Natural killer cell-specific antigen and antibodies that...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/00 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/725 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) C07K 16/46 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 5/18 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2170352

The invention provides a novel natural killer (NK) cell-specific mole- cule consisting of a glycoprotein pair PEN5-alpha and PEN5-beta, mono- clonal antibodies and immunoreactive fragments and derivatives thereof that bind to unique epitopes present on this molecule, and hybridomas that produce the antibodies. Methods of using the antibodies, fragments, and derivatives are also provided. The PEN5-alpha and PEN5-beta glycopro- teins have apparent molecular weights of 120-150 and 210-245 kilodaltons, respectively, as measured by SDS- PAGE on 6 % polyacrylamide gels. The unique epitopes of the glycopro- tein pair are preferentially expressed on the subpopulation of peripheral blood NK cells having the pheno- type CD16+ CD56dim relative to their expression on peripheral blood NK cells having the phenotype CD16+ CD56bright, and are not present on CD3+T lymphocytes or CD20+B lym- phocytes. Figure 1 shows two-color flow cytometry histograms, which col- lectively reveal that the PEN5 epitope is expressed selectively on CD56+ CD16dim peripheral blood lymphocytes.

L'invention concerne une nouvelle molécule spécifique pour des cellules tueuses naturelles (NK) se composant d'une paire de glycoprotéines PEN5-alpha et PEN5-bêta, d'anticorps monoclonaux et de fragments immunoréactifs et de dérivés de ces derniers qui se fixent aux déterminants antigéniques uniques présents sur cette molécule. L'invention a également pour objet des hybridomes qui produisent des anticorps. En outre, l'invention se rapporte à des procédés d'utilisation des anticorps, des fragments et des dérivés de ces derniers. Les glycoprotéines PEN5-alpha et PEN5-bêta présentent des poids moléculaires apparents de 120-150 et 210-245 kilodaltons, respectivement, mesurés par électrophorèse sur des gels de polyacrylamide à 6 % en présence de sulfate de sodium dodécylique. Les déterminants antigéniques uniques de la paire de glycoprotéines sont, de préférence, exprimés sur la sous-population de cellules tueuses naturelles du sang périphérique présentant le phénotype CD16<+> CD56<sombre> par rapport à leur expression sur les cellules tueuses naturelles du sang périphérique présentant le phénotype CD<16+> CD56<claire>. En outre, ils ne sont pas présents sur les lymphocytes CD3<+>T ni sur les lymphocytes CD20<+>B. La figure 1 illustre des histogrammes de cytométrie de flux à deux couleurs, qui montrent tous que le déterminant antigénique PEN5 est exprimé, de manière sélective, sur les lymphocytes CD56<+> et CD16<sombre> du sang périphérique.

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