Neural colony forming assay

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/04 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01)

Patent

CA 2537960

A neural colony forming cell (NCFC) assay is described. The assay allows one to distinguish neural stem cells from neural progenitor cells. In one embodiment, the present invention provides a method for identifying neural stem cells or neural progenitor cells comprising: (a) suspending neural cells in a semi-solid medium which supports the growth of neural cells; (b) plating the cells in the semi-solid medium at a density that allows for the production of colonies; (c) culturing the plated cells until size differences can be discerned between the colonies; and (d) estimating colony size wherein the larger colonies are likely produced by neural stem cells and wherein the small colonies are likely produced by neural progenitor cells In alternate embodiments, NSC can be distinguished from neural progenitor cells by determining the morphology or antigen expression of the colonies.

L'invention concerne une analyse cellulaire de formation de colonies de neurones (NCFC). Ladite analyse permet de distinguer des cellules souches de cellules précurseurs neurales. Dans un mode de réalisation, la présente invention concerne une méthode d'identification de cellules souches neurales ou de cellules précurseurs neurales consistant : (a) à suspendre des cellules neurales dans un milieu semi-solide qui supporte la croissance de cellules neurales ; (b) à étaler les cellules dans le milieu semi-solide selon une densité qui permet de produire des colonies ; (c) à mettre en culture les cellules étalées jusqu'à ce des différences de taille puissent être discernées entre les colonies ; et (d) à évaluer la taille des colonies, les colonies les plus importantes étant vraisemblablement produites par des cellules souches neurales et les petites colonies étant vraisemblablement produites par des cellulles précurseurs neurales. Dans d'autres modes de réalisation, des CSN peuvent être distinguées de cellules précurseurs neurales par détermination de l'expression morphologique ou antigénique des colonies.

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