Non-identical genes and their application in improved...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/12 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2317020

The invention provides a linear concatamer of at least two non-identical DNA sequences which, by virtue of third base redundancy of the genetic code of the codons, each encode the same polypeptide of at least 30 amino acids; wherein the concatamer comprises or consists of a nucleic acid sequence which codes for an oligomer of said polypeptides in a continous reading frame. A single invariant cysteine codon may be added to one DNA sequence to encode a polypeptide derivative with a unique unpaired cysteine. The concatamer may be fused to one or more sequences encoding one or more antigens. The DNA sequences in the concatamer may encode the compliment C3 fragment C3d or an analogue thereof. The invention also provides an expression vector comprising the concatamer nucleic acid sequence and regulatory or other sequences for expression of any oligomeric polypeptide encoded thereby, as well as a host cell comprising the expression vector. The invention can also provide a method of inducing an immune response to an antigen in the human or animal by administering a concatamer or administering a vector. Thus the invention can provide a pharmaceutical composition in the form of a DNA vaccine.

L'invention concerne un concatémère linéaire constitué d'au moins deux séquences d'ADN non identiques qui, du fait de la redondance de la troisième base du code génétique des codons, codent chacune pour le même polypeptide d'au moins 30 acides aminés. Le concatémère comprend ou est constitué d'une séquence d'acide nucléique qui code pour un oligomère desdits polypeptides dans un cadre de lecture continu. Un codon cystéine invariant unique peut être ajouté à une séquence d'ADN de façon à coder pour un dérivé polypeptidique comportant une cystéine unique non appariée. Le concatémère peut être fusionné à une ou plusieurs séquences codant pour un ou plusieurs antigènes. Les séquences d'ADN du concatémère peuvent coder pour le fragment C3d de la protéine C3 du complément ou pour un de ses analogues. L'invention concerne également un vecteur d'expression, comprenant la séquence d'acide nucléique du concatémère et des séquences régulatrices ou autres, qui permet l'expression de n'importe quel polypeptide oligomère codé par ladite séquence, ainsi qu'une cellule hôte renfermant ledit vecteur d'expression. L'invention concerne également une technique qui permet d'induire une réponse immunitaire à un antigène chez l'homme ou chez l'animal en administrant un concatémère ou un vecteur. Elle peut donc permettre de produire une composition pharmaceutique se présentant sous forme de vaccin à base d'ADN.

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