C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/01 (2006.01) C07K 1/20 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)
Patent
CA 2560185
The present invention relates to novel methods for separating hemagglutinin (HA) antigens, comprising the steps of applying a reduced and derivatized antigen preparation comprising solubilized HA antigens and a detergent in a pH controlled solution, on a Reversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) column; and eluting the HA antigens from the column with an ion pairing agent in an organic mobile phase. The invention further relates to quantifying methods using the methods for separating the antigens with the further step of measuring the peak area of the eluted antigen in a chromatogram resulting from the elution step.
La présente invention concerne de nouveaux procédés pour séparer des antigènes d'hémagglutinine (HA) qui consistent à appliquer une préparation d'antigènes réduite et dérivée comprenant des antigènes HA solubilisés et un détergent dans une solution à pH contrôlé, sur une colonne de chromatographie liquide haute performance en phase inverse (RP-HPLC), puis à éluer les antigènes HA de la colonne avec un agent de formation de paire d'ions dans une phase mobile organique. La présente invention concerne également des procédés de quantification qui utilisent lesdits procédés de séparation et qui consistent en outre à mesurer la zone de pic de l'antigène élué dans un chromatogramme résultant de l'étape d'élution.
Kapteyn Johan Christiaan
Lagerwerf Fija Maria
Borden Ladner Gervais Llp
Crucell Holland B.v.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1976792