C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/79 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)
Patent
CA 2195083
This invention relates to novel modified host cells which express heterologous fused proteins and methods of screening for test samples having peptide- binding activity; wherein the modified host cell comprises: (a) a gene sequence encoding a heterologous fusion protein; said fusion protein comprising a first peptide of a peptide binding pair, or segment of said first peptide, which is joined to either a DNA binding domain or its corresponding transcriptional activation domain of a transcriptional activation protein; (b) a gene sequence encoding a heterologous fusion protein, said fusion protein comprising a second peptide of the peptide binding pair in (a), or a segment thereof, fused to either a DNA binding domain or its corresponding transcriptional activation domain, whichever one is not employed in (a); (c) a reporter gene operatively associated with the transcriptional activation protein, or a portion thereof; (d) optionally, a deletion or mutation in the chromosomal DNA of the host cell for the transcriptional activation protein if present in the selected host cell.
Cette invention concerne de nouvelles cellules hôtes modifiées qui expriment des protéines hétérologues fusionnées, aisnsi que des procédés de détection d'une activité de liaison de peptides dans des échantillons tests. La cellule hôte modifiée comprend (a) une séquence de gènes codant une protéine hétérologue de fusion, ladite protéine de fusion comprenant un premier peptide d'une paire de liaisons de peptides, ou un segment dudit premier peptide lequel est joint soit à un domaine de liaison d'ADN soit à son domaine correspondant d'activation transcriptionnelle d'une protéine d'activation transcriptionnelle; (b) une séquence de gènes codant une protéine hétérologue de fusion, ladite protéine de fusion comprenant un second peptide de la paire de liaisons de peptides dans (a) ou un segment de celui-ci, fusionné soit à un domaine de liaison d'ADN soit à son domaine correspondant d'activation transcriptionnelle, l'un ou l'autre de ces deux domaines qui n'est pas utilisé dans (a); (c) un gène rapporteur associé effectivement à la protéine d'activation transcriptionnelle, ou à une partie de celle-ci; (d) éventuellement, une délétion ou une mutation dans l'ADN chromosomique de la cellule hôte pour la protéine d'activation transcriptionnelle si elle est présente dans la cellule hôte sélectionnée.
Ozenberger Bradley A.
Young Kathleen H.
American Cyanamid Company
Smart & Biggar
Wyeth Holdings Corporation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1931058