C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 1/15 (2006.01) C07K 14/39 (2006.01) C07K 14/61 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
Patent
CA 2407382
This invention relates to novel modified host cells which express heterologous fused proteins and methods of screening for test samples having peptide- binding activity; wherein the modified host cell comprises: (a) a gene sequence encoding a heterologous fusion protein; said fusion protein comprising a first peptide of a peptide binding pair, or segment of said first peptide, which is joined to either a DNA binding domain or its corresponding transcriptional activation domain of a transcriptional activation protein; (b) a gene sequence encoding a heterologous fusion protein, said fusion protein comprising a second peptide of the peptide binding pair in (a), or a segment thereof, fused to either a DNA binding domain or its corresponding transcriptional activation domain, whichever one is not employed in (a); (c) a luciferase gene operatively associated with the transcriptional activation protein, or a portion thereof; (d) optionally, a deletion or mutation in the chromosomal DNA of the host cell for the transcriptional activation protein if present in the selected host cell.
La présente invention concerne de nouvelles cellules hôtes modifiées exprimant des protéines fusionnées hétérologues, ainsi que des méthodes de criblage d'échantillons d'essai possédant une activité de liaison des peptides, ces cellules hôtes modifiées comprenant (a) une séquence génétique codant pour une protéine de fusion hétérologue, laquelle protéine comprend un premier peptide d'une paire de liaison de peptide, ou un segment de ce premier peptide, assemblé à un domaine de liaison à l'ADN ou à son domaine d'activation transcriptionnelle correspondant ; (b) une séquence génétique codant pour une protéine de fusion hétérologue, laquelle protéine comprend le second peptide de la paire de liaison de (a), ou un segment de ce peptide, fusionné à un domaine de liaison à l'ADN ou à son domaine d'activation transcriptionnelle correspondant - qui ne soit pas utilisé dans (a) - ; (c) un gène de la luciférase associé de manière fonctionnelle à la protéine d'activation transcriptionnelle ou à une partie de cette dernière ; et (d) éventuellement une délétion ou une mutation dans l'ADN chromosomique de la cellule hôte pour la protéine d'activation transcriptionnelle, si elle est présente dans la cellule hôte sélectionnée.
Cao Jian
Young Kathleen H.
Blake Cassels & Graydon Llp
Wyeth
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2057438