C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) C12N 9/92 (2006.01) C12N 15/61 (2006.01)
Patent
CA 2636176
The invention describes a highly improved, reproducible and a consistent method of transformation and regeneration that results in obtaining 12-15% transgenic plants. The present invention relates to a method of selecting genetically transformed Sunflower explants based on their ability to utilize Xylose as a sole carbohydrate source. Further disclosed is the nucleic acid sequence of the Xylose Isomerase gene, vector construction for incorporation of the selection marker gene and the process of Agrobacterium Mediated Transformation of target host plant with the vector comprising the gene encoding the enzyme Xylose isomerase under the functional combination of the heterologous regulatory sequences. Also disclosed is the method of selecting the putative transformants post transformation with the said vector that possess a metabolic advantage of utilizing Xylose as a sole carbon source. Increased efficiency of regeneration, better growth and survival has been observed on subjection to the described method of positive selection. The subject invention alleviates the disadvantages of negative selection methods such as the undesired elimination of the transformed cells and the potential environmental harm caused due to the dispersal of the antibiotic and the herbicide resistant genes.
L'invention concerne un procédé hautement amélioré, reproductible et cohérent de transformation et de régénération qui permet d'obtenir entre 12 et 15 % de plantes transgéniques. L'invention propose un procédé qui permet de sélectionner des explants de tournesol génétiquement transformés en fonction de leur capacité à utiliser le xylose en tant que source unique d'hydrate de carbone. L'invention concerne en outre la séquence d'acides nucléiques et le gène isomérase du xylose, la construction de vecteur en vue d'une incorporation du gène marqueur de sélection et le procédé de transformation à médiation assurée par Agrobacterium de la plante hôte cible avec ledit vecteur qui comprend le gène codant pour l'enzyme isomérase du xylose par combinaison fonctionnelle des séquences régulatrices hétérologues. L'invention concerne également un procédé de sélection des transformants putatifs post-transformation comprenant ledit vecteur qui possèdent un avantage métabolique caractérisé par l'utilisation du xylose en tant que source unique de carbone. Le procédé de sélection positive de l'invention permet d'améliorer l'efficacité de régénération, et d'obtenir de meilleurs résultats de croissance et de survie. L'invention permet de réduire les inconvénients associés aux procédés de sélection négative de type élimination non désirée des cellules transformées et nuisances environnementales éventuelles causées par la dispersion de gènes résistant aux herbicides et aux antibiotiques.
Morawala Patell Villoo
Rajyashri K. R.
Avesthagen Limited
Morawala Patell Villoo
Rajyashri K. R.
Ridout & Maybee Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1400929