Novel vectors and genes exhibiting increased expression

Details Novel vectors and genes exhibiting increased expression Novel vectors and genes exhibiting increased expression

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/12 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/755 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2312291

Novel genes and vectors exhibiting increased expression and novel splicing patterns are disclosed. The gene can comprise one or more consensus or near consensus splice sites which have been corrected. The gene can alternatively or additionally comprise one or more introns within coding or noncoding sequences. The gene can still further comprise modified 5' and/or 3' untranslated regions optimized to provide high levels and duration of tissue- specific expression. In one embodiment, the gene comprises the coding region of a full-length Factor VIII gene modified by adding an intron within the portion of the gene encoding the .beta.-domain, so that the gene is expressed as a .beta.-domain deleted Factor VIII protein. The novel Factor VIII gene can also be modified to correct one or more consensus or near consensus splice sites within or outside of the coding region.

L'invention concerne des gènes et des vecteurs à expression accrue et des schémas d'épissage. Le type de gène considéré peut comprendre un ou plusieurs sites d'épissage consensus ou à peu près consensus ayant été corrigés. A titre de variante ou en complément, il peut également y avoir dans le gène un plusieurs introns, à l'intérieur de séquences codantes ou non codantes. En outre, le gène peut comporter des régions modifiées non traduites en 5' et/ou en 3', ayant été optimisées pour donner des niveaux et une durée élevés d'expression propre aux tissus. Selon une variante, le gène en question comprend la région de codage d'un gène de facteur VIII pleine longueur, modifié par adjonction d'un intron dans la partie du gène qui code le domaine .beta., de sorte que le gène soit exprimé sous forme de protéine à suppression de facteur VIII du domaine .beta.. Par ailleurs, il est possible de modifier le gène de facteur VIII, afin de corriger un ou plusieurs sites d'épissage consensus ou à peu près consensus à l'intérieur ou à l'extérieur de la région de codage.

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