C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) G01N 27/327 (2006.01)
Patent
CA 2255952
The present invention provides biosensors and methods for the detection selected nucleic acid sequences. In one form the biosensor comprises an electrode and a bilayer membrane having a top and a bottom layer. The bottom layer being proximal to and connected to the electrode in a manner such that a space exists between the membrane and the electrode, with the conductance or impedance of the membrane being dependent on the presence or absence of the selected nucleic acid sequence. The membrane comprises a closely packed array of amphiphilic molecules and a plurality of ion channels comprising first half membrane spanning monomers dispersed in the top layer and second half membrane spanning monomers dispersed in the bottom layer. The first half membrane spanning monomers are capable of lateral diffusion within the upper layer and the second half membrane-spanning monomers are prevented from lateral diffusion within the bottom layer. A first ligand specifically reactive with the selected nucleic acid sequence is attached to an end of a proportion of the first half membrane-spanning monomers proximal the surface of the membrane and a second ligand reactive with the selected nucleic acid or marker attached thereto is attached to an end of the remainder of the first half membrane- spanning monomers proximal the surface of the membrane.
La présente invention se rapporte à des biocapteurs et à des procédés de détection de séquences d'acides nucléiques sélectionnés. Dans une des réalisations de l'invention, ce biocapteur comporte une électrode et une membrane bicouche. Ladite membrane comporte une couche inférieure et une couche supérieure. La couche inférieure se trouve à proximité de l'électrode, à laquelle elle est couplée de telle manière à qu'il existe un espace entre la membrane et l'électrode, la conductance ou l'impédance de la membrane étant fonction de la présence ou de l'absence de la séquence de l'acide nucléique sélectionné. Ladite membrane comporte un réseau serré de molécules amphiphiles et une pluralité de canaux ioniques comportant des monomères recouvrant une première moitié de la membrane, dispersés au sein de la couche supérieure, et des monomères recouvrant une seconde moitié de la membrane, dispersés au sein de la couche inférieure. Les monomères recouvrant la première moitié de la membrane sont aptes à une diffusion latérale au sein de la couche supérieure et les monomères recouvrant la seconde moitié de la membrane sont bloqués vis à vis d'une diffusion latérale au sein de la couche inférieure. Un premier ligand, susceptible de réagir spécifiquement avec la séquence de l'acide nucléique sélectionné, est fixé à une extrémité d'une fraction des monomères recouvrant la première moitié de la membrane, à proximité de la surface de la membrane et un second ligand, susceptible de réagir spécifiquement avec l'acide nucléique sélectionné ou avec un marqueur fixé à cet acide, est fixé à une extrémité du reste des monomères recouvrant la première moitié de la membrane, à proximité de la surface de la membrane.
Braach-Maksvytis Vijoleta Lucija Bronislava
Harding Margaret
Lucas Sally Wright
Ambri Limited
Australian Membrane And Biotechnology Research Institute
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
The University Of Sydney
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1378414