C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/22 (2006.01) C12N 15/66 (2006.01)
Patent
CA 2754161
The present invention relates to a nucleic acid containing at least one homing endonuclease site (HE) and at least one restriction enzyme site (X) wherein the HE and X sites are selected such that HE and X result in compatible cohesive ends when cut by the homing endonuclease and restriction enzyme, respectively, and the ligation product of HE and X cohesive ends can neither be cleaved by the homing endonuclease nor by the restriction enzyme. Further subject-matter of the present invention relates to a vector comprising the nucleic acid of the present invention, host cells containing the nucleic acid and/or the vector, a kit for cloning and/or expression of multiprotein complexes making use of the vector and the host cells, a method for producing a vector containing multiple expression cassettes, and a method for producing multiprotein complexes. The invention also relates to a methods of assembling multiple single vectors ("vector entities") into fusion vectors and to method of disassembling a fusion vector containing multiple of such vector entities into single vectors. The invention is also directed to fusion vectors containing multiple vector entities.
L'invention concerne un acide nucléique contenant au moins un site d'endonucléase de homing (HE, Homing Endonuclease) et au moins un site d'enzyme de restriction (X), les sites HE et X étant sélectionnés de telle sorte qu'ils aient des extrémités cohésives compatibles lorsqu'ils sont coupés respectivement par l'endonucléase de homing et par l'enzyme de restriction, le produit de ligation des extrémités cohésives des sites HE et X ne pouvant pas être clivé par l'endonucléase de homing ou par l'enzyme de restriction. L'invention concerne également un vecteur comportant l'acide nucléique de la présente invention, des cellules hôtes contenant les acides nucléiques et/ou le vecteur, un kit de clonage et/ou d'expression de complexes multiprotéiques faisant usage du vecteur et des cellules hôte, un procédé de production d'un vecteur contenant des cassettes d'expression multiples et un procédé de production de complexes multiprotéiques. L'invention concerne également des procédés d'assemblage de plusieurs vecteurs uniques (« entités vecteur ») en vecteurs de fusion et des procédés de désassemblage d'un vecteur de fusion contenant plusieurs de ces entités vecteur en vecteurs uniques. L'invention concerne également des vecteurs de fusion contenant plusieurs entités vecteur.
Europaisches Laboratorium Fur Molekularbiologie (embl)
Goudreau Gage Dubuc
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1974323