A - Human Necessities – 61 – K
Patent
A - Human Necessities
61
K
A61K 38/39 (2006.01) A61K 31/726 (2006.01) A61K 31/737 (2006.01) A61P 19/02 (2006.01) A61P 19/04 (2006.01) A61P 29/00 (2006.01) C07K 1/12 (2006.01) C07K 14/78 (2006.01) C08L 5/08 (2006.01) C12S 3/02 (2006.01) C12S 3/14 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2474269
The invention relates to a method for isolating from connective tissue a variety of glycosaminoglycan (GAG)-peptide complexes and polypeptides which are substantially free of contaminating DNA and other molecules such as viruses which may be associated with the DNA in the cell. The invention also relates to uses of GAG-peptide complexes and polypeptides substantially free of DNA either directly, or after further processing, for the treatment, protection and restoration of connective tissues in inflammatory and degenerative disorders such as rheumatoid arthritis and osteoarthritis in any of their multiple forms or other degenerative conditions in mammal. Figure 2 shows photomicrographs (magnification X 400) of histological sections of 3mm bovine tracheal cartilage powders particles before and after subjecting them to the autolysis procedure using 100mM calcium acetate buffer, pH 4,5 at 37 degrees C. Panels A and C are sections of cartilage before autolytic processing and B and D after. Panels A and B show the results of staining with Toluidine Blue (TB), a dye which binds to glycosaminoglycans (GAGs) while C and D show sections stained with Masson Trichrome (Masson TC), a dye known to stain native collagen fibres magenta colour. Note the loss of staining for GAGs in section B after autolysis but a slightly increased intensity of staining for collagen following the removal of the majority of GAGs as shown in D. Cell nuclei, identified in these sections by the green counterstains are clearly unchanged by the autolytic process.
La présente invention concerne un procédé permettant l'isolement à partir de tissu conjonctif une variété de complexes glycosaminoglycane(GAG)/peptides et des polypeptides qui sont sensiblement exempts d'ADN contaminants et d'autres molécules telles que des virus qui peuvent être associés aux ADN dans la cellule. L'invention concerne également les utilisations des complexes GAG-peptides et des polypeptides sensiblement exempts d'ADN contaminants soit directement, ou après un traitement supplémentaire, pour le traitement, la protection et la restauration des tissus conjonctifs dans des troubles inflammatoires et dégénératifs tels que la polyarthrite rhumatoïde et l'ostéo-arthrite sous n'importe laquelle de leurs formes multiples ou d'autres condition de dégénérescence chez des mammifères. La figure 2 montre des photomicrographies (agrandissement X 400) de sections histologiques de 3 mm de particules de poudre du cartilage trachéal bovin avant et après leur traitement par un procédé d'autolyse au moyen d'une solution tampon d'acétate de calcium de 100mM, à un pH de 4,5 à 37 ·C. Les planches A et C représentent des sections de cartilage avant le procédé d'autolyse et B et D après. Les planches A et B représentent les résultats de la coloration avec du bleu de toluidine (TB), un colorant qui se lie aux glycosaminoglycanes (GAGs) tandis que C et D représentent des sections colorées en magenta avec du trichrome de Masson (Masson TC), un colorant connu pour la coloration de fibres de collagène natives. Il faut également observer la perte de coloration des GAGs dans la section B après autolyse mais une légère augmentation d'intensité de coloration pour le collagène suite au retrait de la majeure partie des GAGs comme représenté en D. Les noyaux cellulaires, identifiés dans ces sections par les contre-colorants verts sont à l'évidence non modifiés par le procédé d'autolyse.
Ghosh Peter
Shen Bojang
Institute Of Nutraceutical Research Pty Ltd
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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