Optical oxidative enzyme-based sensors

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/26 (2006.01) C12Q 1/54 (2006.01) G01N 21/76 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)

Patent

CA 2340983

The invention discloses enzyme-based optical sensors for detecting blood components which are substrates for oxidative enzymes, the sensors advantageously employing a multiple-layer structure featuring a thin, rapidly responding, optical, oxygen sensing layer. The sensors comprise, in order, a) an enzymatic layer containing an oxidative enzyme or enzyme cascade in a water and oxygen-permeable matrix; b) an oxygen sensing layer containing luminescent dye in a light-transmissive, oxygen-permeable matrix; and which is preferably deposited onto c) a light-transmissive substrate. Embodiments of the invention may further include a rapidly hydrating gas-permeable cover, or spacer, layer deposited over the enzymatic layer. A particulate filler material may be included in an effective amount in the oxygen sensing layer to reduce sample light scattering effects. The sensors of the disclosure may be used to detect creatinine and other enzyme-oxidizable analytes such as glucose, lactate or cholesterol, and may be made easily using standard coating techniques known in the art. These sensors are suitable for multiple analyses, but the materials and methods used allow the sensors to be disposable as well, allowing their wide use in medical and analytical applications.

La présente invention concerne des détecteurs optiques à base d'enzymes oxydatives convenant à la détection de composants sanguins constituants des substrats pour enzymes oxydatives. Ces détecteurs mettent en oeuvre une structure multicouche constituant une couche fine et à réponse rapide de détection optique de l'oxygène. Les détecteurs comprennent dans l'ordre suivant, a) une couche enzymatique, b) une couche détectrice d'oxygène, et c) un substrat photoémetteur. La couche enzymatique (a) contient une enzyme oxydative ou une cascade d'enzymes dans une matrice perméable à l'eau et l'oxygène. La couche détectrice d'oxygène (b) contient un pigment luminescent bloqué dans une matrice photoémettrice perméable à l'oxygène. Cette couche détectrice d'oxygène (b) est réalisée de préférence par dépôt sur le substrat photoémetteur (c). Des réalisations de l'invention peuvent en outre comprendre une couche à hydratation rapide et perméable aux gaz, venant en couverture ou en intercalaire et déposée sur la couche enzymatique. Un matériau de comblement particulaire peut également être inclus en quantité suffisante dans la couche de détection de l'oxygène de façon à atténuer les effets de dispersion de la lumière de l'échantillon. Les détecteurs de l'invention peuvent également s'utiliser pour détecter la créatinine ainsi que d'autres analytes à oxydation enzymatique tels que les glucoses, les lactates ou les cholestérols. Ces détecteurs peuvent se fabriquer directement au moyen des techniques d'enduction déjà connues. Ces détecteurs conviennent pour les analyses multiples. Toutefois, les matériaux et les procédés utilisés permettent également de faire des détecteurs jetables, ce qui permet une large utilisation de ces détecteurs dans des applications médicales et d'analyse.

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