Optical waveguide method for detecting specific binding...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 21/77 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01)

Patent

CA 2197321

A waveguide binding assay method involves detecting the scattering of light directed into the waveguide, the scattering being the result of scattering labels specifically bound to the waveguide within the penetration depth of an evanescent wave. The waveguide may be transparent plastic or glass and the binding is typically by oligonucleotide hybridization or immunological capture. Light scattering labels include colloidal metals or non-metals, including gold, selenium and latex. A light absorbing member consisting of dye or concentrated particles may also be employed to enhance signal. Real-time binding and dissociation can be monitored visually or by video imaging, such as with a CCD camera and frame grabber software. Hybridization mismatches of as few as one base can be distinguished by real-time melting curves.

Une méthode de dosage par liaison utilisant un guide d'ondes consiste à détecter la diffusion de la lumière dirigée dans le guide d'ondes, la diffusion résultant des marqueurs de diffusion liés spécifiquement au guide d'ondes à l'intérieur de la profondeur de pénétration d'une onde évanescente. Le guide d'ondes peut être en plastique ou en verre transparent et la fixation se fait typiquement par hybridation d'oligonucléotides ou par une capture immunologique. On peut citer à titre de marqueurs de diffusion de la lumière des métaux ou des non métaux colloïdaux comme l'or, le sélénium et le latex. Un élément absorbant la lumière constitué d'un colorant ou de particules concentrées peut également être utilisé pour augmenter le signal. Une fixation et une dissociation en temps réel peuvent être suivies directement ou en vidéo, par exemple avec une caméra à éléments photosensibles à transfert de charges et un logiciel d'enregistrement d'images. Une hybridation avec une erreur d'appariement sur une seule base peut être mise en évidence par des courbes de fusion en temps réel

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