Optimized and defined method for isolation and preservation...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/073 (2010.01) C12N 5/071 (2010.01) A61K 35/44 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)

Patent

CA 2701907

The present invention refers to an optimized and defined method for isolation and preservation of precursor cells from human umbilical cord. Besides being reproducible and 100% reliable, in terms of the number of samples processed, the method results in a high and defined number of precursor cells, being the majority obtained after a single adhesion and expansion/multiplication phase ex vivo (thus granting cell phenotype), in a shorter time frame than what was previously described in the state-of-the-art. With this method, it is possible to obtain, in 9 days, after direct freezing of a cell fraction, and after one expansion/multiplication phase ex vivo (end of PO) of the majority of the cells, about 8, 6, 6 ( 0, 1) xiϑs cells/gram of processed umbilical cord. In turn, the characteristics of the cells allow, for example, after 35 days, obtaining an average of 7,7x1015 cells, with precursor phenotype, from 100% of processed umbilical cord samples. The method, because it is simple, robust and 100% reliable, can be performed under good manufacturing practices (GMP) in laboratories dedicated to cell therapy in humans. Furthermore, the method has applications in the pharmaceutical, cosmetic and biotechnology areas.

La présente invention porte sur un procédé optimisé et défini pour l'isolement et la préservation de cellules précurseurs provenant de cordon ombilical humain. En plus d'être reproductible et 100 % fiable, en termes du nombre d'échantillons traités, le procédé conduit à un nombre élevé et défini de cellules précurseurs, étant la majorité obtenue après une seule adhésion et une phase d'expansion/multiplication ex vivo (accordant ainsi le phénotype cellulaire), dans un intervalle de temps plus court que ce qui a été précédemment décrit dans l'état antérieur de la technique. Avec ce procédé, il est possible d'obtenir, en 9 jours, après congélation directe d'une fraction cellulaire, et après une phase d'expansion/multiplication ex vivo (fin de PO) de la majorité des cellules, environ 8,6 (±0,1) x 105 cellules/gramme de cordon ombilical traité. Ensuite, les caractéristiques des cellules permettent, par exemple, après 35 jours, d'obtenir une moyenne de 7,7 x 1015 cellules, avec un phénotype de précurseur, à partir de 100 % des échantillons de cordon ombilical traités. Le procédé, en raison du fait qu'il est simple, robuste et fiable à 100 %, peut être effectué dans les bonnes pratiques de fabrication (GMP) dans des laboratoires dédiés à la thérapie cellulaire chez les êtres humains. De plus, le procédé a des applications dans les domaines pharmaceutique, cosmétique et biotechnologique.

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