C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/11 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/66 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C40B 40/06 (2006.01)
Patent
CA 2360011
The present invention provides techniques for producing DNA product molecules that may be easily and directly ligated to recipient molecules. The product molecules need not be cleaved with restriction enzymes in order to undergo such ligation. In preferred embodiments of the invention, the DNA product molecules are produced through iterative DNA synthesis reactions, so that the product molecules are amplified products. The invention further provides methods for directed ligation of product molecules (i. e., for selective ligation of certain molecules within a collection of molecules), and also for methods of exon shuffling, in which multiple different products molecules are produced in a single ligation reaction. Preferred embodiments of the invention involved ligation of product molecules encoding functional protein domains, particularly domains naturally found in conserved gene families.
La présente invention se rapporte à un système perfectionné permettant de lier entre eux des acides nucléiques. Elle se rapporte notamment à des techniques de production de produits moléculaires d'ADN qui peuvent subir une ligature directe et facile avec des molécules réceptrices. Il n'est pas nécessaire que lesdits produits moléculaires subissent un clivage avec des enzymes de restriction aux fins de ladite ligature. Dans les réalisations préférées de l'invention, les produits moléculaires d'ADN sont obtenus au moyen de réactions de synthèse d'ADN itératives de manière que ces produits moléculaires sont des produits amplifiés. L'invention se rapporte en outre à la ligature directe de produits moléculaires (c'est-à-dire à la ligature sélective de certaines molécules appartenant à un ensemble de molécules), et également à des méthodes de redistribution d'exons, selon lesquelles de multiples produits moléculaires différents sont produits au cours d'une seule réaction de ligature. Les réalisations préférées de cette invention concernent la ligature de produits moléculaires codant des domaines de protéines fonctionnelles, et notamment de domaines qui se trouvent naturellement dans des familles de gènes conservés. Le système de manipulation d'ADN de cette invention peut être facilement intégré à d'autres systèmes de manipulation d'acides nucléiques, tels que les systèmes à médiation assurée par des ribozymes, et il peut en outre être facilement automatisé.
Coljee Vincent W.
Donahue William
Jarrell Kevin A.
Mikheeva Svetlana
Robic
Trustees Of Boston University
LandOfFree
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