C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 1/113 (2006.01)
Patent
CA 2527158
The folding/oxidation of a reduced peptide or partially reduced peptide to form a disulphide bridged peptide is effected by dissolving it in an oxidizing organic solvent, alone or in admixture with water, adding an aqueous alkaline buffer to the solution, and recovering the resultant disulphide bridged peptide. The preferred oxidizing organic solvent is dimethylsulphoxide, which is desirably used as a 10 to 50% aqueous solution. The addition of the aqueous alkaline buffer, which is preferably a 0.2 M Tris-HCI buffer, is preferably added during a period of from 5 to 90 minutes after dissolution of the reduced peptide in the oxidizing organic solvent. The method allows reduced peptides which are insoluble in alkaline conditions to be oxidized and allows reduced peptides which may form stable but inactive oxidized species if treated with dimethylsulphoxide alone to be fully oxidized.
Le pliage/oxydation d'un peptide réduit ou partiellement réduit pour former un peptide à pont disulfure est réalisé(e): par dissolution du peptide dans un solvant organique de réduction par l'oxyde utilisé seul ou dans un mélange avec de l'eau; adjonction d'un tampon alcalin aqueux à la solution; et récupération du peptide à pont disulfure résultant. Le solvant organique de réduction par l'oxyde préféré est le diméthylsulfoxyde, qui est utilisé autant que possible sous forme de solution aqueuse à 10 à 50 %. L'adjonction du tampon alcalin aqueux, qui est de préférence un tampon de tris-HCI 0,2 M, s'effectue de préférence au cours d'une période de 5 à 90 minutes suivant la dissolution du peptide réduit dans le solvant organique de réduction par l'oxyde. La méthode permet, d'une part d'oxyder des peptides réduits, qui sont insolubles dans des conditions alcalines, d'autre part d'oxyder complètement des peptides réduits pouvant former des espèces oxydées stables mais inactives s'ils sont traités uniquement avec le diméthylsulfoxyde.
Fajloun Ziad
Sabatier Jean-Marc
Cellpep Sa
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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