C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/12 (2006.01) C07K 14/435 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01)
Patent
CA 2440592
The disclosure provides proteins that can be used to determine the redox status of an environment (such as the environment within a cell or subcellular compartment). These proteins are green fluorescent protein (GFP) variants (also referred to as redox sensitive GFP (rosGFP) mutants), which have been engineering to have two cysteine amino acids near the chromophore and within disulfide bonding distance of each other. Also provided are nucleic acid molecules that encode rosGFPs, vectors containing such encoding molecules, and cells transformed therewith. The disclosure further provides methods of using the rosGFPs (and encoding molecules) to analyze the redox status of an environment, such as a cell, or a subcellular compartment within a cell. In certain embodiments, both redox status and pH are analyzed concurrently.
L'invention concerne des protéines pouvant être utilisées pour déterminer l'état d'oxydoréduction d'un environnement (tel que l'environnement à l'intérieur d'un compartiment cellulaire ou sous-cellulaire). Ces protéines sont des variants protéiques vert fluorescent (GFP), (également désignés en tant que mutants sensibles à l'oxydoréduction GFP (rosGFP)), qui ont été modifiés afin de comporter deux acides aminés de cystéine, près du chromophore, séparés les uns des autres par une distance inférieure à la distance de liaison d'un disulfide. L'invention concerne également des molécules d'acide nucléique codant des rosGFP, des vecteurs contenant de telles molécules codantes, et des cellules transformées par de telles molécules. L'invention concerne encore des procédés d'utilisation des rosGFP (et des molécules codantes) permettant d'analyser l'état d'oxydoréduction d'un environnement, tel qu'une cellule, ou un compartiment sous-cellulaire à l'intérieur d'une cellule. Dans certains modes de réalisation, à la fois l'état d'oxydoréduction et le pH sont analysés concurremment.
Hanson George T.
Remington James S.
Smart & Biggar
The State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Hig
LandOfFree
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