P28 bap31 a bcl-2 associated protein and use thereof for the...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/00 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2198988

The present invention provides a Bcl-2-interacting protein. This Bcl-2-interacting protein has been purified and shown to be identical to a previously described 28 kDa protein (p28) called Bap31 /CDM. Human p28 is a polytopic integral protein of the endoplasmic reticulum (ER) whose cytosolic domain contains overlapping death effector domain and leucine zipper homologies, flanked on either side by identical caspase recognition sites. Following apoptotic stimuli in the absence of Bcl-2, p28 was cleaved at both caspase recognition sites. One of the cleavage products, p20, caused induction of apoptosis when expressed ectopically in otherwise normal cells. All of these events were prevented by elevated expression of Bcl-2. p28 Bap31 may be a Bcl-2-regulated component of an apoptosis signaling pathway, perhaps involving coordinated ER-mitochondrial events. P28 Bap31 itself or the cleavage of p28 Bap31 and the cleavage products thereof are useful in diagnostic kits, laboratory reagents, assays and development of reagents for the treatment of disease relating to apoptosis.

La présente invention concerne une protéine interagissant avec Bcl-2. Cette protéine interagissant avec Bcl-2 a été purifiée et on a démontré qu'elle était identique à une protéine de 28 kDa (p28) décrite antérieurement appelée Bap31/CDM. La p28 humaine est une protéine intrinsèque polytopique du réticulum endoplasmique (RE) dont le domaine cytosolique contient des homologies chevauchantes du domaine effecteur de la mort cellulaire et de la fermeture éclair à leucine, flanquées de part et d'autre par des sites identiques de reconnaissance de la caspase. Après les stimuli apoptotiques en l'absence de Bcl-2, la p28 a été clivée aux deux sites de reconnaissance de la caspase. Un des produits de clivage, p20, a induit de l'apoptose lorsqu'il a été exprimé de manière ectopique dans des cellules par ailleurs normales. Tous ces événements ont pu être empêchés par l'expression à un degré élevé de Bcl-2. La p28 Bap31 peut être un constituant régulé par Bcl-2 d'une voie de signalisation de l'apoptose, faisant peut-être intervenir des événements RE-mitochondriaux coordonnés. La p28 Bap31 elle-même ou le clivage de p28 Bap31 et les produits de clivage de cette dernière trouvent plusieurs utilités : trousses diagnostiques, réactifs de laboratoire, essais et élaboration de réactifs pour le traitement de maladies liées à l'apoptose.

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