C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/31 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) A61K 39/002 (2006.01) A61K 39/38 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01) A61K 39/40 (2006.01) A61K 49/00 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C07K 14/29 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2407740
Canine monocytic ehrlichiosis, caused by Ehrlichia canis is a potentially fatal disease of dogs that requires rapid and accurate diagnosis in order to initiate appropriate therapy leading to a favorable prognosis. In the invention described herein, a new immunoreactive E. canis surface protein gene of 1170-bp was cloned, which encodes a protein with a predicted molecular mass of 42.6 kilodaltons (P43). The P43 gene was not found in E. chaffeensis DNA by Southern blot, and antisera against recombinant P43 (rP43) did not react with E. chaffeensis by IFA. The P43 was located on the surface of E. canis by immunoelectron microscopy. Forty-two dogs exhibiting signs and/or hematologic abnormalities associated with canine ehrlichiosis were tested by IFA and by Western immunoblot. Among the 22 samples that were IFA positive for E. canis, 100 % reacted with the rP43, 96 % with the rP28, and 96 % with the rP140. The specificity of the recombinant proteins compared to IFA was 96 % for rp28, 88 % for P43 and 63 % for P140. Results of this study demonstrate that the rP43 and rP28 are sensitive and reliable serodiagnostic antigens for the diagnosis of Ehrlichia canis infections.
L'ehrlichiose monocytaire du chien, induite par Ehrlichia canis est une maladie des chiens potentiellement mortelle qui nécessite un diagnostic rapide et précis de façon à lancer la thérapie appropriée débouchant sur un pronostic favorable. Dans la présente invention, on a cloné un nouveau gène de protéine de surface immunoréactif de E. canis de 1170-bp, codant pour une protéine d'une masse moléculaire calculée de 42,6 kilodaltons (P43). Ce gène P43 n'a pas été découvert dans l'ADN de E. chaffeensis par technique de Southern, et les antisérums dirigés contre le gène P43 de recombinaison (rP43) ne réagissent pas avec E. chaffeensis par test d'immunofluorescence (IFA). Le gène P43 a été localisé sur la surface de E. canis par immunoélecromicroscopie. Quarante deux chiens présentant des signes et/ou des anomalies hématologiques associés à l'ehrlichiose du chien ont été testés par IFA et par immunoblot de type Western. Parmi les 22 échantillons positifs à l'IFA pour E. canis, 100 % ont réagi avec la protéine de recombinaison rP43, 96 % avec la protéine de recombinaison rP28, et 96 % avec la protéine de recombinaison r P140. La spécificité de ces protéines de recombinaison comparées à l'IFA était 96 % pour rP28, 88 % pour P43 et 63 % pour P140. Les résultats de cette étude démontrent que les protéines de recombinaison rP43 et rP28 sont des antigènes de sérodiagnostic sensibles et fiables pour le diagnostic des infections par Ehrlichia canis.
Mcbride Jere W.
Walker David H.
Borden Ladner Gervais Llp
Research Development Foundation
LandOfFree
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