Pap mutants that exhibit anti-viral and/or anti-fungal...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/29 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) A01H 5/10 (2006.01) C07K 14/415 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/18 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2226342

Disclosed are PAP mutants having reduced phytotoxicity compared to wild-type PAP, and which confer broad spectrum resistance to viruses and/or fungi in plants. One group of PAP mutants is characterized by at least one amino acid substitution in the N-terminus of mature PAP, such as the Glycine 75 residue or the Glutamic acid 97 residue; two groups of additional PAP mutants are characterized by truncations in the N-terminal region of mature PAP and truncations or amino acid substitutions in the C-terminal region of mature PAP, respectively; and a further group is enzymatically inactive which still exhibit anti-fungal properties. Also disclosed are DNA molecules encoding the PAP mutants, mutant PAP DNA constructs, and transgenic seed and plants containing the DNAs. Further disclosed are methods for identifying PAP mutants having reduced phytotoxicity, as well as isolated and purified PAP mutants identified by the method.

Cette invention concerne des mutants de la protéine antivirale de Phytolacca americana (PAP) qui présentent une phytotoxicité réduite en comparaison de la protéine PAP d'origine naturelle et qui confèrent aux plantes une résistance à large spectre face aux virus et/ou aux mycètes. Un groupe de mutants de la protèine PAP est caractérisé par au moins une substitution d'acide aminé, de type résidu de Glycine 75 ou acide glutamique 97, sur l'extrémité N-terminale de la protéine PAP mature; deux groupes de mutants supplémentaires de la protéine PAP sont caractérisés, l'un par des troncatures au niveau de la région N-terminale de la protéine PAP mature et l'autre par des troncatures ou des substitutions d'acides aminés au niveau de la région C-terminale de la protéine PAP mature; un autre groupe qui ne présente pas d'activité enzymatique possède cependant des propriétés antifongiques. L'invention concerne en outre des molécules d'ADN codant ces mutants de la protéine PAP, des produits mutants d'assemblage d'ADN de la protéine PAP ainsi que des semences et des plantes transgéniques contenant ces ADN. L'invention concerne par ailleurs des procédés permettant d'identifier des mutants de la protéine PAP dotés d'une phytotoxicité réduite, ainsi que les mutants de la protéine PAP isolés et purifiés conformément à de tels procédés.

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