C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2439402
A method for balancing multiplexed PCR methods is provided. In the method, two or more sequential temporal PCR stages are used to effectively separate two or more PCR reactions in a single tube as an alternative to primer limiting to modulate the relative rate of production of a first amplicon by a first primer set and a second amplicon by a second primer set during the first and second amplification stages. Also provided are rapid RT-PCR methods that find particular use in intraoperative diagnoses and prognoses, for instance in diagnosing malignant esophageal adenocarcenoma by determining expression levels of carcinoembryonic antigen (CEA) in sentinel lymph nodes.
L'invention concerne un procédé servant à équilibrer plusieurs procédés de réaction en chaîne de la polymérase (PCR). Ce procédé consiste à mettre en application deux ou plusieurs stades séquentiels temporels de PCR afin de séparer deux ou plusieurs réactions de PCR effectuées dans un seul tube en tant qu'alternative à une limitation d'amorce, de manière à moduler la vitesse relative de production d'un premier amplicon par un premier ensemble d'amorçage, et d'un deuxième amplicon par un deuxième ensemble d'amorçage pendant le premier et le deuxième stades d'amplification. Elle concerne également des procédés rapides de RT-PCR utilisés de façon spécifique afin de prononcer des diagnostics et des pronostics intra-opératoires, par exemple, pour diagnostiquer un adénocarcinome oesophagien maligne par détermination des niveaux d'expression de l'antigène carcinoembryonaire (CEA) dans des ganglions lymphatiques sentinelles.
Finkelstein Sydney D.
Godfrey Tony E.
Kelly Lori A.
Luketich James D.
Raja Siva
Ridout & Maybee Llp
University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Ed
LandOfFree
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