C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2377508
A method for the detection of a target nucleic acid, which method comprises contacting template nucleic acid from a sample with (i) a signalling system and (ii) a tailed nucleic acid primer having a template binding region and the tail comprising a linker and a target binding region, in the presence of appropriate nucleoside triphosphates and an agent for polymerisation thereof, under conditions such that the template binding region of the primer will hybridise to a complementary sequence in the template nucleic acid and be extended to form a primer extension product, separating any such product from the template whereupon the target binding region in the tail of the primer will hybridise to a sequence in the primer extension product corresponding to the target nucleic acid, and wherein any such target specific hybridisation causes a detectable change in the signalling system such that the presence or absence of the target nucleic acid in the sample is detected by reference to the presence or absence of a detectable change in the signalling system.
L'invention concerne un procédé de détection d'un acide nucléique cible. Le procédé consiste à placer un acide nucléique matrice provenant d'un échantillon au contact I) d'un système signal et, ii) d'une amorce d'acide nucléique à queue qui présente une région de liaison à la matrice et dont la queue comprend un lieur et une région de liaison cible, en présence de triphosphates nucléosidiques appropriées et d'un agent de polymérisation desdits triphosphates, dans des conditions telles que la région de liaison à la matrice de l'amorce s'hybride avec une séquence complémentaire dans l'acide nucléique matrice et s'allonge pour former un produit d'allongement de l'amorce. Le procédé consiste ensuite à séparer un tel produit de la matrice de sorte que, d'une part, la région de liaison cible dans la queue de l'amorce s'hybride dans le produit d'allongement avec une séquence correspondant à l'acide nucléique cible, et que, d'autre part, une telle hybridation spécifique cible provoque dans le système signal un changement notable tel que la présence ou l'absence de l'acide nucléique cible dans l'échantillon soit décelée en fonction de la présence ou de l'absence d'un changement notable dans le système signal.
Gibson Neil James
Little Stephen
Theaker Jane
Whitcombe David Mark
Dxs Limited
Qiagen Manchester Limited
Smart & Biggar
LandOfFree
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