Peptide production as fusion protein in transgenic mammal milk

Details Peptide production as fusion protein in transgenic mammal milk Peptide production as fusion protein in transgenic mammal milk

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/62 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C07K 14/575 (2006.01) C07K 14/585 (2006.01) C07K 14/76 (2006.01) C07K 14/81 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2187173

Peptides can be produced in and purified from the milk of transgenic animals. The peptides are made as fusion proteins with a suitable fusion partner such as .alpha.-lactalbumin, which is a natural milk protein. The fusion partner protein acts to promote secretion of the peptides and, at least in the case of .alpha.-lactalbumin, allows a single-step purification based on specific affinity. The peptide is released from the purified fusion protein by a simple cleavage step and purified away from the now liberated .alpha.-lactalbumin by repeating the same affinity purification method. A particular advantage of producing peptides via this route, in addition to the obvious advantages of high yield and biocompatibility, is that specific post-translational modifications, such as carboxy terminal amidation, can be performed in the mammary gland.

On peut produire et purifier des protéines à partir du lait d'animaux transgéniques. Ces peptides sont transformés en protéines de fusion à l'aide d'un agent de fusion approprié tel que l'.alpha.-lactalbumine, qui est une protéine naturelle du lait. Cette protéine à agent de fusion agit afin de promouvoir la sécrétion des peptides et, au moins dans le cas de l'.alpha.-lactalbumine, permet une purification en une seule étape basée sur une affinité spécifique. Le peptide est libéré de la protéine de fusion purifiée par une étape de clivage simple, et il est purifié hors de l'.alpha.-lactalbumine maintenant libérée par répétition du même procédé de purification par affinité. Un des avantages de production des peptides par ce moyen, outre les avantages évidents constitués par un rendement élevé et une biocompatibilité, réside en ce que l'on peut effectuer dans la glande mammaire des modifications spécifiques post-traductionnelles, telles qu'une amidation carboxy terminale.

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