Peptides which enhance transport across tissues and methods...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 2/00 (2006.01) A61K 47/42 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2235226

A method of identifying a peptide which permits or facilitates the transport of an active agent through a human or animal tissue. A predetermined amount of phage from a random phage library or preselected phage library is plated onto or brought into contact with a first side, preferably the apical side, of a tissue sample or polarized tissue cell culture. At a predetermined time, the phage which is transported to a second side of the tissue opposite the first side, preferably the basolateral side, is harvested to selected transported phage. This modified phage is amplified in a host. This cycle of events is repeated (using the transported phage produced in the most recent cycle) a predetermined number of times to obtain a selected phage library containing phage which can be transported from the first side to the second side. Lastly, the identity of at least one peptide coded by phage in the selected phage library is determined to identify a peptide which permits or facilitates the transport of an active agent through a human or animal tissue.

La présente invention concerne un procédé d'identification d'un peptide permettant ou favorisant le transport d'un principe actif au travers d'un tissu humain ou animal. Le procédé consiste à prendre une certaine quantité de phages choisis dans une bibliothèque aléatoire de phages ou une bibliothèque de phages sélectionnés, à appliquer une couche de ces phages contre un premier côté, de préférence apical, d'un échantillon tissulaire ou d'une culture polarisée de cellules tissulaires, ou à mettre en contact ces phages avec le premier côté. Le procédé consiste ensuite, à un instant défini, à récolter le phage transporté vers le second côté du tissu, à l'opposé du premier côté, de préférence le côté basolatéral, et à sélectionner le phage transporté. Le phage modifié est soumis à amplification à l'intérieur d'un hôte. Le procédé consiste alors à répéter ce cycle d'événements (en utilisant le phage transporté issu du cycle de production le plus récent) un certain nombre de fois jusqu'à obtenir une bibliothèque de phages sélectionnés contenant un phage capable d'être transporté du premier côté au second côté. Le procédé consiste enfin à déterminer, dans la bibliothèque de phages sélectionnés, l'identité de l'un au moins des peptides codés par le phage, lequel peptide permet ou favorise le transport d'un principe actif au travers d'un tissu humain ou animal.

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