C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) A01N 63/00 (2006.01) C07K 14/32 (2006.01) C07K 14/325 (2006.01) C07K 14/415 (2006.01) C12N 5/14 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12N 15/866 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01)
Patent
CA 2369964
Disclosed are polynucleotides encoding a pesticidal fusion polypeptide comprising (i) a toxin domain; and (ii) a heterologous binding domain capable of binding non-specifically to a cell membrane without disrupting that membrane. Preferably the toxin domain is derived from a Bacillus thuringiensis cry toxin (e.g. CryIA (b) or (c)) and the binding domain is derived from a lectin (e.g. ricin toxin B chain). The use of such fusions may help to inhibit the acquisition of resistance in a pest population treated with the polypeptide. A further aspect of the invention is a method of assessing the toxicity of a polypeptide to a pest species by expressing a nucleic acid encoding said polypeptide in a host cell from that species, observing the viability of the cell and correlating the results of the observation with the toxicity of the polypeptide, wherein the viability is determined by assessing esterase activity or membrane integrity.
On décrit des molécules d'acide nucléique codant un polypeptide de fusion pesticide comprenant (i) un domaine de toxine ; et (ii) un domaine de liaison hétérologue capable de se lier de manière non spécifique à une membrane cellulaire sans briser cette dernière. De préférence, le domaine de toxine est dérivé d'une toxine cry de Bacillus thuringiensis (par exemple, CryIA(b) ou (c) et le domaine de liaison est dérivé d'une lectine (par exemple la chaîne B de toxine de ricin). L'utilisation de ces fusions peut favoriser l'inhibition de l'acquisition de la résistance dans une population de parasites traitée avec le polypeptide. On décrit également des procédés et des matériaux permettant de produire et d'utiliser les acides nucléiques et les polypeptides codés par ces derniers, ainsi que des vecteurs (par exemple de baculovirus ou des vecteurs adaptés pour être utilisés dans une plante), des cellules hôtes, des plantes et autres. Un autre aspect de l'invention concerne un procédé permettant d'évaluer la toxicité d'un polypeptide à l'encontre d'une espèce de parasites qui consiste : (i) à introduire un acide nucléique codant ledit polypeptide dans une cellule hôte provenant de cette même espèce, (ii) à provoquer ou à permettre l'expression de l'acide nucléique dans une cellule hôte provenant de ladite espèce, (iii) à observer la viabilité de la cellule et à mettre en corrélation les résultats de l'observation et la toxicité du polypeptide, la détermination de la viabilité étant fondée sur l'évaluation de l'activité estérase ou de l'intégrité de la membrane.
Christou Paul
Mehlo Luke
Fetherstonhaugh & Co.
Fraunhofer-Gesellschaft Zur Forderung Der Angewandten Forschung
Plant Bioscience Limited
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1453850