C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01)
Patent
CA 2375831
Methods and constructs are provided for the introduction of multiple genes into plants using a single transformation event. Coordinated expression of genes in the cassette, producing proteins with native amino acid sequences, is achieved by production of one polycistronic mRNA that contains separate translation initiation signals for each enzyme coding region. Bicistronic constructs contain a single 5' promoter, protein encoding sequence 1, an IRES, protein encoding sequence 2, and a single 3' polyadenylation sequence. For polycistronic constructs, additional cassettes of protein encoding sequences, in which each coding region is preceded by an IRES, can be inserted between protein encoding sequence 2 and the polyadenylation sequence. The methods and constructs are useful for creating plants with stacked input traits (e.g., glyphosate tolerant plants producing BT toxin) and/or value added products (e.g., the production of PHAs in plants).
L'invention concerne des méthodes et des produits de synthèse permettant d'introduire dans des plantes de multiples gènes, par un évènement de transformation unique. L'expression coordonnée des gènes dans la cassette, produisant des protéines avec des séquences d'acides aminés natifs, est effectuée par production d'un ARNm polycistronique contenant des signaux d'initiation de traduction séparés pour la région codante de chaque enzyme. Les produits de synthèse bicistroniques contiennent un promoteur 5' unique, une séquence 1 codant pour les protéines, une séquence IRES, une séquence 2 codant pour les protéines, et une séquence de polyadénylation 3' unique. Pour les produits de synthèse polycistroniques, des cassettes supplémentaires de séquences codant pour les protéines, dans lesquelles chaque région codante est précédée par une séquence IRES, peuvent être insérées entre la séquence 2 codant pour les protéines et la séquence de polyadénylation. Ces méthodes et ces produits de synthèse s'utilisent pour créer des plantes avec de multiples traits (par exemple des plantes résistant au glyphosate produisant la toxine BT) et/ou des produits à valeur ajoutée (par exemple la production de PHAs dans les plantes).
Aquin Stephanie
Peoples Oliver P.
Snell Kristi D.
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Metabolix Inc.
LandOfFree
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