C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/74 (2006.01) C07K 14/745 (2006.01) C12N 9/64 (2006.01)
Patent
CA 2116691
The present invention describes a process for activating Factor II to Factor IIa by incubating Factor II in the pressence of Factor V, Factor Xa, phospholipids, and calcium ions. Each of the factors is prepared from a single impure protein fraction which includes Factors II, V and X. The Factor II, V and X purification procedure comprises the steps of DEAE ligand chromatography and precipitation by the addition of barium chloride. Factor V is recovered from the barium chloride supernatant, and Factors II and X are contained in the barium chloride precipitate. The barium chloride precipitate is dissolved in an aqueous solution and is applied to a chromatographic resin coupled with a ligand which binds Factor X and Factor II weakly or not at all. Factor II is recovered from the fraction, which remains unbound or weakly bound to the Factor X binding ligand. Factor Xa is prepared by recovering Factor X from the ligand during the Factor II preparation procedure and activating the Factor X to Factor Xa by specific proteolytic cleavage.
La présente invention décrit un procédé pour activer le Facteur II en Facteur IIa par incubation du Facteur II en présence de Facteur V, de Facteur Xa, de phospholipides et d'ions calcium. Chacun des facteurs est préparé à partir d'une fraction protéique impure unique qui comprend les Facteurs II, V et X. La méthode de purification des Facteurs II, V et X comprend les étapes de chromatographie sur DEAE-ligand et précipitation par addition de chlorure de baryum. Le Facteur V est récupéré du surnageant de la solution de précipitation au chlorure de baryum et les Facteurs II et X sont contenus dans le précipitat. Le précipitat est dissous dans une solution aqueuse et est appliqué sur une résine chromatographique couplée à un ligand qui ne se lie pas, ou qui ne se lie que faiblement, au Facteur X et au Facteur II. Le Facteur II est récupéré dans la fraction, qui demeure non liée ou faiblement liée au ligand liant le Facteur X. Le Facteur Xa est préparé en récupérant le Facteur X du ligand durant le procédé de préparation du Facteur II et en activant le Facteur X en Facteur Xa par clivage protéolytique spécifique.
Herring Steven W.
Noda Munehiro
Shitanishi Kenneth T.
Uemura Yahiro
Alpha Therapeutic Corporation
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
Plasma fraction purification does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Plasma fraction purification, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Plasma fraction purification will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1599283