C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2601841
A method for detecting the presence or absence of a polymorphism at a particular position within a nucleic acid sequence in a sample, said method comprising i) annealing a pair of probes to said nucleic acid sequence, said probes being designed such that they anneal adjacent each other, and only completely anneal to one form of the sequence, in a reaction mixture which is substantially free of ATP; ii) ligating together any completely annealed pairs of probes in the presence of NAD and a nucleic acid ligase which uses NAD as a substrate/ iii) phosphorylating any AMP released by a ligation event to ATP, and iv) detecting ATP, in particular using a bioluminescent reaction, in the resultant reaction mixture. Kits for conducting this method are also described and claimed.
L'invention concerne un procédé de détection de la présence ou de l'absence d'un polymorphisme à une position particulière dans une séquence d'acides nucléiques dans un échantillon, ledit procédé comprenant les étapes consistant à i) anneler une paire de sondes à ladite séquence d'acides nucléiques, lesdites sondes étant conçues de telle sorte qu'elles s'annèlent de manière adjacente l'une de l'autre, et s'annèlent complètement seulement à une forme de la séquence, dans un mélange réactionnel qui est essentiellement exempt d'ATP ; ii) ligaturer ensemble toutes les paires de sondes complètement annelées en présence de NAD et d'une acide nucléique ligase qui utilise NAD en tant que substrat, iii) phosphoryler toute AMP libérée par une ligature à l'ATP, et iv) détecter l'ATP, en particulier, en utilisant une réaction bioluminescente, dans le mélange réactionnel résultant. Des kits destinés à effectuer ce procédé sont également décrits et revendiqués.
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Enigma Diagnostics Ltd
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1363072