C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 16/00 (2006.01) C07K 1/04 (2006.01) C07K 5/113 (2006.01) C07K 7/06 (2006.01) C07K 7/08 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) C07K 16/30 (2006.01) C12N 1/02 (2006.01) C12N 5/12 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01)
Patent
CA 2192455
The invention provides a non-enzymatic method for the release of cells which have beem positively selected from a heterogeneous cell suspension by antibody-mediated binding to beads or other solid support. The method entails forming within the cell suspension a complex comprising the solid support linked to a primary monoclonal antibody, which in tum is bound to a cell surface antigen on the target cells. The complex is separated from the cell suspension, and then contacted with a specific peptide which binds to the primary antibody, displacing the antibody from the cell surface antigen, thereby releasing the target cell from the complex. The invention also provides methods for positive/negative cell selection wherein target cells having a first antigen are selected from a heterogeneous cell suspension containing undesired cells having a second antigen. The invention also provides methods for identifying a specific peptide useful for the release of a target cell from the binding of a specific monoclonal antibody. The methods of the invention are particularly useful for the positive selection of CD34+ hematopoietic stem cells and the concomitant purging of undesired tumor cells or lymphocytes from the positively selected cell population. The purified CD34+ cell composition is then useful for reinfusion to a cancer patient after high-dose therapy in order to reconstitute the patient's immune system.
Cette invention se rapporte à un procédé non enzymatique pour la libération de cellules qui ont été sélectionnées positivement à partir d'une suspension de cellules hétérogène par fixation, à médiation anticorpale, sur des bandes ou d'autres supports solides. Ce procédé consiste à former à l'intérieur de la suspension cellulaire un complexe comprenant le support solide lié à un anticorps monoclonal primaire, qui à son tour est fixé à un antigène de surface cellulaire sur les cellules cibles. Ce complexe est séparé de la suspension cellulaire et il est ensuite mis en contact avec un peptide spécifique qui se fixe à l'anticorps primaire, déplacant ainsi l'anticorps de l'antigène de surface cellulaire, ce qui libère la cellule cible du complexe. Cette invention décrit également des procédés pour une sélection cellulaire positive/négative, dans lesquels les cellules cibles ayant un premier antigène sont sélectionnées à partir d'une suspension de cellules hétérogène contenant des cellules non désirées ayant un second antigène. Cette invention décrit en outre des procédés pour identifier un peptide spécifique servant à libérer une cellule cible de sa fixation à un anticorps monoclonal spécifique. Ces procédés servent particulièrement à obtenir la selection positive de cellules souches hématopoïétiques CD34+ et pour purger simultanément les cellules ou les lymphocytes tumoraux indésirés contenus dans la population de cellules sélectionnées positivement. Cette composition de cellules CD34+ purifiée est ensuite utile pour être réinjectée dans le corps d'un patient atteint de cancer après une thérapie à forte dose, afin de reconstituer le système immunitaire dudit patient.
Al-Abdaly Fahad A.
Deans Robert J.
Guillermo Roy
Helgerson Sam L.
Kobori Joan A.
Baxter International Inc.
Nexell Therapeutics Inc.
Sim & Mcburney
LandOfFree
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