Preparation of purified (poly)peptides

Details Preparation of purified (poly)peptides Preparation of purified (poly)peptides

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 1/14 (2006.01) C07K 1/107 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01)

Patent

CA 2265249

The invention provides for a method for the modification of (poly)peptides for facilitating purification thereof, which modification method comprises the insertion of at least one specifically cleavable amino acid at the end of the (poly)peptide chain during synthesis thereof and protecting the same amino acid(s) within the (poly)peptide, if present, against cleavage, in order to allow for specific cleavage precisely at the specifically cleavable amino acid(s). The invention further relates to a process for the preparation of purified (poly)peptides using the modification method. The process comprises the steps of synthesizing the desired (poly)peptide; adding at least one specifically cleavable amino acid at the end of the (poly)peptide, while having protected the same amino acid(s) within the (poly)peptide, if present, against cleavage; elongating the (poly)peptide and the amino acid(s) added thereto with a tag sequence to obtain an elongated polypeptide; purifying the elongated (poly)peptide by means of a tag-specific purification method; and removing the tag sequence and the additional amino acid(s) from the elongated (poly)peptide by means of a cleavage method specific for the additional amino acid(s) to obtain the purified (poly)peptide.

L'invention concerne un procédé pour modifier des (poly)peptides pour faciliter la purification de ces derniers. Ce procédé consiste à insérer au moins un acide aminé pouvant être coupé à l'extrémité de la chaîne de (poly)peptides pendant la synthèse de ces derniers, et à protéger le(s) acides aminé(s) éventuellement présent(s) dans le (poly)peptide contre tout clivage, afin de ne permettre que le clivage spécifique précisément au niveau de l'acide ou des acides aminé(s) pouvant être coupé(s) de manière spécifique. L'invention concerne, en outre, un procédé de préparation de (poly)peptides purifiés selon ce procédé de purification. Ce procédé comprend les étapes consistant à synthétiser le (poly)peptide requis; à ajouter au moins un acide aminé pouvant être coupé à l'extrémité du (poly)peptide, tout en protégeant le(s) acides aminé(s) éventuellement présent(s) dans le (poly)peptide contre tout clivage; à allonger le (poly)peptide et l'acide ou les acides aminé(s) ajouté(s) à ces derniers avec une séquence de marqueurs pour obtenir un polypeptide allongé; à purifier le (poly)peptide allongé par le procédé de purification spécifique à des marqueurs; et à retirer la séquence de marqueurs et l'acide ou les acides aminé(s) ajouté(s) du (poly)peptide allongé selon un procédé de clivage spécifique pour l'acide ou les acides aminé(s) supplémentaire(s) pour obtenir le (poly)peptide purifié.

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