C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01)
Patent
CA 2680121
Methods and kits are provided for nucleic acid analysis. In an illustrative method a target nucleic acid is amplified using a first primer and a second primer, wherein the first primer comprises a probe element specific for a locus of the target nucleic acid and a template-specific primer region, and the probe element is 5' of the template-specific primer region, subsequently allowing the probe element to hybridize to the locus to form a hairpin, generating a melting curve for the probe element by measuring fluorescence from a dsDNA binding dye as the mixture is heated, wherein the dye is not covalently bound to the first primer, and analyzing the shape of the melting curve. Kits may include one or more of the first and second primers, the dsDNA binding dye, a polymerase, and dNTPs.
L'invention concerne des procédés et des trousses pour une analyse d'acide nucléique. Dans un procédé illustratif, un acide nucléique cible est amplifié à l'aide d'une première amorce et d'une seconde amorce, la première amorce comprenant un élément de sonde spécifique pour un locus de l'acide nucléique cible et une région d'amorce spécifique à la matrice et l'élément de sonde se trouve à 5' de la région d'amorce spécifique à la matrice, permettant par la suite à l'élément de sonde de s'hybrider au locus pour former une boucle en épingle à cheveux, générant une courbe de fusion pour l'élément de sonde en mesurant la fluorescence d'un colorant se liant à l'ADNds lorsque le mélange est chauffé, le colorant ne se liant pas de manière covalente à la première amorce et en analysant la forme de la courbe de fusion. Les nécessaires peuvent comprendre une ou plusieurs des première et seconde amorces, du colorant se liant à l'ADNds, une polymérase et de dNTPs.
Poritz Mark Aaron
Wittwer Carl T.
Zhou Luming
Idaho Technology
Sim & Mcburney
University Of Utah Research Foundation
LandOfFree
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