C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/02 (2006.01) C12M 1/20 (2006.01) C12M 3/04 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)
Patent
CA 2188932
A method for testing the potential fertility of spermatozoa in a sample by contacting an aliquot of the sperm sample onto a protein extracted from native vitelline membranes removed from chicken or turkey eggs to enable quantification of the number of sperm which bind to the protein. Typically, the vitelline membrane protein is coated onto a solid substrate and the protein extract is first prepared by dissecting vitelline membranes (lamina perivitellina plus lamina extravitellina) from either a group of chicken eggs or a group of turkey eggs, rinsing the membranes free of albumin and yolk and subdividing the membranes into small particles. The resulting protein is heat solubilized, purified with centrifugation and concentrated to yield the protein extract in solution. The extracted protein then is used as a protein substrate for spermatozoa binding, with sequential contacting of the protein extract with the spermatozoa and measuring the amount of sperm-egg binding that takes place. Intact egg membranes may alternatively be used to bind sperm. Correlation between sperm-egg binding and fertility of the spermatozoa in the sample is direct and linear.
Un procédé permet d'évaluer la fertilité potentielle des spermatozoïdes d'un échantillon en mettant un aliquote de cet échantillon en contact avec un type de protéine extraite de membranes vitellines natives prélevées sur des oeufs de poule ou de dinde, ce qui permet de chiffrer le nombre de spermatozoïdes qui se lient à cette protéine. En général, la protéine de membrane vitelline est déposée sur un substrat solide et l'extrait de protéine est préparé d'abord en découpant des membranes vitellines (lamina perivitellina plus lamina extravitellina) d'une groupe d'oeufs de poule ou de dinde, en rinçant l'albumine et le vitellus présents sur ces membranes et en divisant ces dernières en petites particules. Les protéines résultantes sont solubilisées pour donner l'extrait de protéine en solution. Les protéines extraites servent alors de substrat protéinique pour la liaison des spermatozoïdes, par la mise en contact séquentielle de l'extrait de protéines avec les spermatozoïdes, et on peut mesurer les liaisons sperme-oeufs qui interviennent. On peut aussi utiliser des membranes d'oeufs intactes pour la liaison du sperme. La corrélation entre les liaisons sperme-oeufs et la fertilité des spermatozoïdes de l'échantillon est directe et linéaire.
Barbato Guy F.
Cramer Palmer G.
Hammerstedt Roy H.
Penn State Research Foundation (the)
Smart & Biggar
LandOfFree
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