C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2372665
There is disclosed an improved high-throughput and quantitative process for determining methylation patterns in genomic DNA samples based on amplifying modified nucleic acid, and detecting methylated nucleic acid based on amplification-dependent displacement of specifically annealed hybridization probes. Specifically, the inventive process provides for treating genomic DNA samples with sodium bisulfite to create methylation-dependent sequence differences, followed by detection with fluorescence-based quantitative PCR techniques. The process is particularly well suited for the rapid analysis of a large number of nucleic acid samples, such as those from collections of tumor tissues.
L'invention concerne un procédé quantitatif amélioré à haut rendement permettant de déterminer des motifs de méthylation dans des échantillons d'ADN génomique, sur la base d'une amplification d'acides nucléiques modifiés et d'une détection des acides nucléiques méthylés en fonction du déplacement, dépendant de l'amplification, de sondes d'hybridation hybridées spécifiquement. Spécifiquement, le procédé de l'invention comporte les étapes consistant à traiter des échantillons d'ADN génomique avec du bisulfite de sodium pour produire des différences de séquence dépendant de la méthylation, puis à mettre en oeuvre une détection à l'aide de techniques de PCR à fluorescence. Le procédé convient particulièrement bien en vue de l'analyse rapide d'un grand nombre d'échantillons d'acides nucléiques, tels que ceux provenant de prélèvements de tissus tumoraux.
Danenberg Kathleen D.
Eads Cindy A.
Laird Peter W.
Smart & Biggar
University Of Southern California
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1918761