Process for immobilizing biomaterial on a substrate

Details Process for immobilizing biomaterial on a substrate Process for immobilizing biomaterial on a substrate

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 11/14 (2006.01) C07K 17/14 (2006.01) C12N 9/86 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/551 (2006.01) G01N 33/552 (2006.01)

Patent

CA 2202034

In order to immobilise bio-material, e.g. enzymes, micro-organisms, cells, organelles, etc., on a substrate with a Si3N4 surface with bonding-active NHx groups, use is made of a hetero-functional cross-linking agent with a bio- material coupling function on the one hand and a NHx-reactive group on the other. The immobilisation substrate preferably takes the form of a 10-1000 mm thick Si3N4 layer which is separated from SiH4/NH3 by CVD and coated with bonding-active NHx groups by hydrolysing surface cleaning, especially with dilute acid. Advantageously, a hetero-bifunctional cross-linking agent is first caused to react with an NH2-reactive aldehyde, ester, halide, epoxide, imine or isocyanate group and, after the removal of unbonded superfluous cross- linking agent, coupled to the biomaterial by means of the bio-reactive group.

Pour immobiliser un biomatériau tel que des enzymes, des micro-organismes, des cellules, des organites cellulaires, etc, sur un substrat présentant une surface en Si¿3?N¿4? ayant des groupes produisant une liaison, on utilise un réticulant hétérobifonctionnel ayant d'une part une fonction d'accouplement avec le biomatériau et d'autre part un groupe NH¿x?-réactif. Le substrat d'immobilisation se présente de préférence sous la forme d'une couche de Si¿3?N¿4? de 10 à 1000 mm d'épaisseur, séparée d'un mélange SiH¿4?/NH¿3? par procédé de dépôt chimique en phase vapeur, et pourvue de groupes NH¿x? produisant une liaison, par nettoyage superficiel hydrolisant, notamment avec de l'acide dilué. Avantageusement, un réticulant hétérobifonctionnel comportant un groupe aldéhyde, ester, halogénure, époxy, imine ou isocyanate NH¿2?-réactif, est mis tout d'abord à réagir avec la surface Si¿3?N¿4?, puis est accouplé au biomatériau grâce au groupe bioréactif, après élimination du surplus de réticulant non lié.

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