C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
P
C12P 21/02 (2006.01) C12N 1/38 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01)
Patent
CA 2203373
A process is provided for producing a heterologous polypeptide in bacteria, which process comprises: (a) culturing bacterial cells, which cells comprise nucleic acid encoding a DsbA or DsbC protein, nucleic acid encoding the heterologous polypeptide, a signal sequence for secretion of both the DsbA or DsbC protein and the heterologous polypeptide, and an inducible promoter for both the nucleic acid encoding the DsbA or DsbC protein and the nucleic acid encoding the heterologous polypeptide, under conditions whereby expression of the nucleic acid encoding the DsbA or DsbC protein is induced prior to induction of the expression of the nucleic acid encoding the heterologous polypeptide, and under conditions whereby either both the heterologous polypeptide and the DsbA or DsbC protein are secreted into the periplasm of the bacteria or the heterologous polypeptide is secreted into the medium in which the bacterial cells are cultured; and (b) recovering the heterologous polypeptide from the periplasm or the culture medium.
Selon un procédé de production de polypeptides hétérologues dans des bactéries, (a) on cultive des cellules bactériennes qui contiennent un acide nucléique de codage d'une protéine DsbA ou DsbC, un acide nucléique de codage du polypeptide hétérologue, une séquence de signalisation de la sécrétion des protéines DsbA ou DsbC et du polypeptide hétérologue, et un promoteur inductible de l'acide nucléique de codage de la protéine DsbA ou DsbC et de l'acide nucléique de codage du polypeptide hétérologue, dans des conditions telles que l'expression de l'acide nucléique de codage des protéines DsbA ou DsbC soit induite avant que l'expression de l'acide nucléique de codage du polypeptide hétérologue ne soit induite, le polypeptide hétérologue et les protéines DsbA ou DsbC étant sécrétés dans le cytoplasme de la bactérie ou le polypeptide hétérologue étant sécrété dans le milieu de culture des cellules bactériennes; et (b) on récupère le polypeptide hétérologue dans le cytoplasme ou dans le milieu de culture.
Joly John C.
Swartz James R.
Dennison Associates
Genentech Inc.
LandOfFree
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