Process for producing a protein

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 14/775 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) C07K 1/18 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2212125

The present invention relates to a substantially endotoxin-free apolipoprotein A (ApoA) or apolipoprotein E (ApoE) and a process for producing the same, by separating the endotoxins from the ApoA or ApoE, or variants or mixtures thereof, by contacting a first aqueous solution containing said ApoA or ApoE with a matrix containing an immobilized compound with an end group comprising two or three nitrogen atoms bonded to a carbon atom, and subsequently treating the matrix containing an immobilized compound with a second aqueous solution containing a surfactant, or by contacting a first aqueous solution containing said ApoA or ApoE with an anion-exchange matrix, and subsequently treating the anion-exchange matrix with a second aqueous solution containing a compound comprising two or three nitrogen atoms bonded to a carbon atom. The invention further relates to use of a matrix containing an immobilized compound comprising two or three nitrogen atoms bonded to a carbon atom and a solution containing a surfactant, or an anion-exchange matrix and a solution containing a compound comprising two or three nitrogen atoms bonded to a carbon atom, for removing endotoxins from aqueous solutions containing ApoA or ApoE, or variants or mixtures thereof. The thus produced ApoA or ApoE can be used for the manufacture of a medicament in the treatment of atherosclerosis and cardiovascular diseases, as well as in a method for treatment of atherosclerosis and cardiovascular diseases when administered in a therapeutically effective amount.

L'invention concerne une apolipoprotéine A (ApoA) ou une apolipoprotéine E (ApoE) sensiblement exempte d'endotoxines et un procédé de production de celles-ci. Ledit procédé consiste à séparer les endotoxines de l'ApoA ou ApoE, ou de variantes ou de mélanges de celles-ci, par mise en contact d'une première solution aqueuse contenant ladite ApoA ou ApoE avec une matrice contenant un composé immobilisé comprenant un groupe de terminaison constitué de deux ou trois atomes d'azote liés à un atome de carbone, et à traiter ladite matrice avec une seconde solution aqueuse contenant un tensioactif, ou par mise en contact d'une première solution aqueuse contenant ladite ApoA ou ApoE avec une matrice échangeuse d'ions, et à traiter la matrice échangeuse d'ions avec une seconde solution aqueuse contenant un composé présentant deux ou trois atomes d'azote liés à un atome de carbone. L'invention se rapporte également à l'utilisation d'une matrice contenant un composé immobilisé présentant deux ou trois atomes d'azote liés à un atome de carbone et une solution contenant un tensioactif, ou d'une matrice échangeuse d'ions et d'une solution contenant deux ou trois atomes d'azote liés à un atome de carbone, en vue d'extraire les endotoxines des solutions aqueuses contenant ApoA ou ApoE, ou de variantes ou mélanges de ces dernières. L'ApoA ou ApoE ainsi produite peut être utilisée pour la fabrication d'un médicament dans le traitement de l'athérosclérose et de maladies cardio-vasculaires lorsqu'elle est administrée en dose thérapeutiquement efficace.

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