Process for producing maturation bone morphogenetic protein

Details Process for producing maturation bone morphogenetic protein Process for producing maturation bone morphogenetic protein

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 14/51 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2253233

A process for producing a maturation bone morphogenetic protein by the action of a processing enzyme on a bone morphogenetic protein precursor, which comprises either introducing an expression vector of a bone morphogenetic protein precursor and an expression vector of a processing enzyme into an aminol cell strain, culturing the resultant strain to yield a maturation bone morphogenetic protein, and separating the same from the culture, or alternatively adding a solution of a processing enzyme to a solution of a bone morphogenetic protein precursor and incubating the obtained solution mixture. A suitable process comprises introducing an expression vector of a human MP52 precursor and an expression vector of a secretory furin variant into an established animal cell strain, culturing the resultant strain to yield a maturation bone morphogenetic protein, and separating the same from the culture.

Cette invention se rapporte à un procédé pour produire une protéine morphogénétique osseuse de maturation, grâce à l'action d'une enzyme de traitement sur un précurseur de protéine morphogénétique osseuse. Ce procédé consiste soit à introduire un vecteur d'expression d'un précurseur de protéine morphogénétique osseuse et un vecteur d'expression d'une enzyme de traitement dans une souche de cellules amino, à cultiver la souche qui en résulte pour produire une protéine morphogénétique osseuse de maturation, et à séparer cette protéine du milieu de culture; soit, dans une variante, à ajouter une solution d'une enzyme de traitement à une solution d'un précurseur de protéine morphogénétique osseuse et à laisser incuber le mélange de solution ainsi obtenu. Un procédé approprié consiste à introduire un vecteur d'expression d'un précurseur de MP52 humaine et un vecteur d'expression d'un variant de furine de sécrétion dans une souche de cellules animales établie, à cultiver la souche qui en résulte pour produire une protéine morphogénétique osseuse de maturation, et à séparer cette protéine du milieu de culture.

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