C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
530/15.06, 195/1
C12N 15/85 (2006.01) A61K 38/18 (2006.01) C07K 14/48 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/18 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2030108
The invention provides replicable expression vectors for the expression of human .beta.-NGF, methods for producing human .beta.-NGF using them, the protein produced by the method and pharmaceutical compositions comprising the protein. The vectors, specifically plasmids pMSGphNGF, pSV40MTphNGF and pSV40phNGF, comprise a first DNA sequence which codes for human .beta.-NGF, a second DNA sequence which codes for prepro .beta.- NGF and is fused to the 5' end of the first DNA sequence, and a promoter-enhancer regulatory element directly fused to the 5' end of the second DNA sequence. The vectors provide for expression of human prepro NGF of preferentially the form wherein initiation is from the methionine codon at position - 121 relative to the prepro cleavage site, thus giving the protein preferentially expressed in human brain tissue.
L'invention fournit des vecteurs d'expression capables de réplication pour l'expression du bêta-NGF humain, des méthodes pour produire du bêta-NGF humain avec ces vecteurs, la protéine produite par la méthode et des compositions pharmaceutiques comprenant la protéine. Les vecteurs, et plus spécifiquement les plasmides pMSGphNGF, pSV40MTphNGF et pSV40phNGF, comprennent une première séquence d'ADN qui code le bêta-NGF humain, une seconde séquence d'ADN qui code le prépro-bêta-NGF et qui est fusionnée à l'extrémité 5' de la première séquence d'ADN, et un élément de régulation promoteur-activateur directement fusionné à l'extrémité 5' de la seconde séquence d'ADN. Les vecteurs permettent l'expression du prépro-NGF humain, de préférence, de la forme dont l'initiation provient du codon méthionine à la position 121 par rapport au site de clivage du prépro-NGF, ce qui donne une protéine qui s'exprime préférentiellement dans le tissu cérébral humain.
Callegaro Lanfranco
Della Valle Francesco
Negro Alessandro
Fidia S.p.a.
G. Ronald Bell & Associates
LandOfFree
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