Processes for refolding of insulin

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 1/113 (2006.01) C07K 14/62 (2006.01)

Patent

CA 2724510

The invention provides processes for obtaining a precursor for insulin, analogs or derivatives thereof having correctly bonded cystine bridges. The process involves solubilizing a precursor of insulin, insulin analog or derivatives in an aqueous solution or a buffer containing cysteine or cysteine hydrochloride and one or more of chaotropic auxiliary. The solubilized precursors are refolded by adding diluent to the solubilized mixture (reverse dilution). Further, the solubilized precursors, wherein the concentration of precursor in reaction mixture is more than 0.65g/litre can also be refolded by diluting the reaction mixture with a diluent optionally comprising about 5-40 % v/v of one or more of alcoholic or aprotic solvents.

La présente invention concerne des procédés pour obtenir un précurseur d'insuline, ou danalogues ou de dérivés de celle-ci ayant des ponts cystine correctement liés. Le procédé met en uvre la solubilisation dun précurseur dinsuline, dun analogue dinsuline ou de dérivés de celle-ci dans une solution aqueuse ou un tampon contenant de la cystéine ou du chlorhydrate de cystéine et un ou plusieurs additifs chaotropiques. Les précurseurs solubilisés sont repliés en ajoutant un diluant au mélange solubilisé (dilution inverse). De plus, les précurseurs solubilisés, où la concentration de précurseur dans le mélange de réaction est supérieure à 0,65 g/litre peuvent également être repliés en diluant le mélange de réaction avec un diluant comprenant facultativement environ 5 à 40 % v/v dun ou plusieurs solvants alcooliques ou aprotiques.

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