C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
P
C12P 21/02 (2006.01) C12N 5/075 (2010.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/725 (2006.01)
Patent
CA 2508925
The present invention describes methods and processes for the production of proteins, particularly glycoproteins, by animal cell or mammalian cell culture, illustratively, but not limited to, fed-batch cell cultures. The methods comprise feeding the cells with D-galactose, preferably with feed medium containing D-galactose, preferably daily, to sustain a sialylation effective level of D-galactose in the culture for its duration, thus increasing sialylation of the produced proteins. The methods can also comprise at least two temperature shifts performed during the culturing period, in which the temperature is lower at the end of the culturing period than at the time of initial cell culture. The cell culture processes of the invention involving two or more temperature shifts sustain a high cell viability, and can allow for an extended protein production phase. The methods can also comprise the delayed addition of polyanionic compound at a time after innoculation. Supplementation of the cultures with D-galactose, preferably in a feed medium, to sustain galactose at sialylation effective levels in the cultures until the end of a culture run reverses a decline in sialylation that accompanies culture scale up, and is advantageous for large scale culturing processes.
L'invention concerne des procédés et des traitements destinés à la production de protéines, notamment des glycoprotéines, par culture de cellules animales ou mammifères, notamment, entre autres, des cultures de cellules à écoulement discontinu. Ces procédés consistent à alimenter des cellules avec du galactose D, de préférence avec un support d'alimentation contenant du galactose D, si possible, à une cadence quotidienne, afin de maintenir un niveau efficace de sialylation du galactose D dans la culture afin de que cette dernière dure, augmentant ainsi la sialylation des protéines produites. Le procédé peut également comprendre au moins deux changements de température réalisés durant la période de culture, au cours desquels la température est inférieure à la fin de la période de culture qu'au début. Les traitements de culture de cellules de l'invention impliquent deux ou plusieurs changements de température permettant de conserver une viabilité élevée des cellules et permettant une phase de production de protéines étendue. Ils consistent également à ajouter un composé polyanionique délayé après inoculation. L'apport complémentaire de galactose D dans les cultures, de préférence dans un support d'alimentation, en vue de conserver le galactose à des niveaux efficaces de sialylation dans les cultures jusqu'à la fin du déroulement d'une culture inverse un déclin dans la sialylation accompagnant la mise à l'échelle de la culture, et se révèle avantageux dans des traitements de culture à grande échelle.
Basch Jonathan D.
Gangloff Scott
Joosten Christoph E.
Kothari Dharti
Lee Steven S.
Bristol-Myers Squibb Company
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1577737