Production and application of transgenic mushroom mycelium...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/80 (2006.01) A01H 15/00 (2006.01) C12N 15/04 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2167152

The invention involves different methods to modify genetic characteristics of homobasidiomycetes in particular commercial homobasidiomycetes such as the common or button mushroom Agaricus bisporus via treatment with donor DNA or fusions using protoplasts and via matings between strains. The methods may be used for the improvement of commercial characteristics and for the commercial production of enzymes and metabolites. The invention is in particular directed at a method for obtaining a selectable stable transformant of a homobasidiomycete capable of expressing integrated donor DNA comprising at least a dominant selectable marker at a detectable level, wherein said host is optionally non-auxotrophic and can be transformed without cotransformation with said dominant selectable marker and is transformed with said donor DNA. The invention is also directed at a method for production of stable transgenic fruitbodies directly from transformed heterokaryons or indirectly through mating or protoplast fusion of transformants obtained through mating of transformants obtained. A method for providing a genetic fingerprint of both homokaryotic and heteroakaryotic material obtained through transformation is also described as well as a method for producing homokaryotic, material from heterokaryotic material. A specific vector for use in transformation is described as is a method for producing such a vector.

L'invention concerne différents procédés de modification de caractéristiques génétiques d'homobasidiomycètes, en particulier, des homobasidiomycètes commercialisables, tel que le champignon commun ou le jeune champignon de couche de l'espèce Agaricus bisporus, au moyen d'un traitement par ADN donneur ou de fusions utilisant des protoplastes, ainsi qu'au moyen de conjugaisons entre des souches. On peut utiliser les procédés pour l'amélioration des caractéristiques commerciales et pour la production commerciale des enzymes et des métabolites. L'invention concerne notamment un procédé d'obtention d'un transformant sélectionnable stable d'un homobasidiomycète pouvant exprimer l'ADN donneur intégré comprenant au moins un marqueur sélectionnable dominant à un niveau détectable, dans lequel ledit hôte est éventuellement non auxotrophe et peut être transformé sans cotransformation par ledit marqueur sélectionnable dominant et est transformé par ledit ADN donneur. L'invention concerne également un procédé de production de sporophores transgéniques stables directement à partir d'hétérocaryons transformés ou indirectement par conjugaison ou fusion protoplastique de transformants obtenus par appariement de transformants obtenus. Elle concerne également un procédé de constitution d'une empreinte génétique de matière à la fois homocaryote et hétécaryote obtenue par transformation, ainsi qu'un procédé de production de matière homocaryote à partir de matière hétérocaryote transformée. Enfin, elle concerne un vecteur spécifique s'utilisant dans la transformation, ainsi qu'un procédé de production dudit vecteur.

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