Production and secretion of proteins of bacterial origin in...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/80 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 9/24 (2006.01) C12N 9/42 (2006.01) C12N 15/56 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12S 3/08 (2006.01) D21C 9/10 (2006.01)

Patent

CA 2241968

The present invention is related to an improved production of bacterial proteins in filamentous fungus, e.g. in Trichoderma and Aspergillus. The improvement is achieved by constructing expression vectors, which comprise the bacterial protein encoding DNA sequences fused in frame with a DNA sequence encoding a filamentous fungus secretable protein or one or more functional domains of said protein. Filamentous fungus hosts transformed with such expression vectors secrete the desired proteins or enzymes, especially xylanases or cellulases originating from bacteria or more preferably from actinomycetes into the culture medium of the host. The desired proteins or enzymes can be used directly from the culture medium after separation of host cells or recovered and treated using down-stream processes, which are appropriate for the respective application. Xylanases or cellulases from actinomycetes produced using the above expression vectors are most suitable for treating plant derived materials, e.g. in pulp and paper industries.

La présente invention concerne une production améliorée de protéines bactériennes dans un champignon filamenteux, par exemple le Trichoderma et l'Aspergillus. L'amélioration s'obtient grâce à la construction de vecteurs d'expression qui comprennent la protéine bactérienne codant des séquences d'ADN fusionnées en cadre avec une séquence d'ADN codant une protéine qui peut être sécrétée par un champignon filamenteux ou bien un ou plusieurs domaines fonctionnels de cette protéine. Des hôtes de champignons filamenteux transformés avec de tels vecteurs d'expression sécrètent les protéines ou enzymes désirées, en particulier des xylanases ou des cellulases provenant de bactéries ou, de préférence, d'actinomycètes, les faisant apparaître dans le milieu de culture de l'hôte. Les protéines ou enzymes désirées peuvent être utilisées directement, à partir du milieu de culture, après séparation de cellules hôtes, ou récupérées et traitées en utilisant des processus en aval qui conviennent pour l'application considérée. Les xylanases ou cellulases d'actinomycètes produites en utilisant les vecteurs d'expression ci-dessus conviennent parfaitement pour traiter des matières d'origine végétale, par exemple dans les industries de la pâte à papier et du papier.

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