Production of helper dependent adenovirus vectors based on...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)

Patent

CA 2363061

The present invention relates to methods for efficient and reliable construction of adenovirus vectors which contain and express foreign DNA and are useful cells, for vaccines and for gene therapy. The invention provides for the growth and purification of adenovirus vectors (belper dependent vectors or HDVs) from which all or most of the viral genes have been removed. The vector system described herein is a new method designed to eliminate helper viruses from the final HDV preparation by cleavage of the helper virus DNA with an endonuclease, alone or in combination with other methods known to limit the level of helper virus contamination of helper dependent vector preparations. The disclosed methods and compositions also provide for regulated control of gene expression.

L'invention porte sur des procédés efficaces et fiables de construction de vecteurs d'adénovirus contenant et exprimant de l'ADN étranger et s'avérant utiles pour le transfert de gènes dans des cellules de mammifères, pour l'élaboration de vaccins et pour la thérapie génique. L'invention assure la croissance et la purification de vecteurs d'adénovirus (vecteurs dépendant d'auxiliaires ou HDVs) dont on a retiré la totalité ou presque des gènes viraux. Le système de vecteurs décrit ici est un nouveau procédé conçu pour éliminer les virus auxiliaires de la préparation finale de HDV par clivage de l'ADN du virus auxiliaire au moyen d'une endonucléase, utilisé seul ou en association avec d'autres procédés connus pour limiter le niveau de contamination par des virus auxiliaires des préparations de vecteurs dépendant de ces virus auxiliaires. Les procédés et compositions de l'invention permettent également de réguler la commande d'expression des gènes.

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