Production of pharmaceutical-grade plasmid dna

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/64 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C07K 14/74 (2006.01)

Patent

CA 2179603

The invention relates to a method for producing plasmid DNA comprising the steps of: (a) lysing cells containing the plasmid DNA to obtain a lysate; (b) treating the lysate by a means for removing insoluble material to obtain a solute; and (c) applying the solute to differential PEG precipitations and chromatography to purify the plasmid DNA. In other embodiments of the invention, the plasmid DNA is produced with GRAS reagents; the plasmid DNA is produced in the absence of enzymes; the plasmid DNA is produced in the absence of organic extractants; the plasmid DNA is produced in the absence of mutagens; the lysing, treating and applying steps are scalable to result in the large scale manufacture of the plasmid DNA; and the lysing, treating and applying steps result in the generation of pharmaceutical grade material.

L'invention concerne un procédé de production d'ADN plasmidique comprenant les étapes suivantes: (a) la lyse de cellules contenant l'ADN plasmidique pour en obtenir un lysat; (b) le traitement du lysat selon un procédé visant à enlever les substances insolubles pour obtenir un soluté; et (c) soumission de ce soluté à différentes précipitations au moyen de polyéthylène glycol (PEG) et à une chromatographie pour purifier l'ADN plasmidique. Dans d'autres modes de réalisation de l'invention, l'ADN plasmidique est produit en présence de réactifs "GRAS" (généralement reconnus inoffensifs); l'ADN plasmidique est produit en l'absence d'enzymes; l'ADN plasmidique est produit en l'absence d'agents d'extraction organiques; l'ADN plasmidique est produit en l'absence de mutagènes; les étapes de lyse, de traitement et de précipitation sont susceptibles d'être réalisées sur une plus grande échelle, pour déboucher sur la fabrication en masse de l'ADN plasmidique; et les étapes de lyse, de traitement et de précipitation débouchent sur la création d'une substance d'une qualité permettant son utilisation dans l'industrie pharmaceutique.

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