C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 1/19 (2006.01) A61K 39/39 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01) C12N 15/79 (2006.01)
Patent
CA 2637947
Cell lines having genetically modified glycosylation pathways that allow them to carry out a sequence of enzymatic reactions, which mimic the processing of glycoproteins in humans, have been developed. Recombinant proteins expressed in these engineered hosts yield glycoptoteins more similar, if not substantially identical, to their human counterparts. The lower eukaryotes, which ordinarily produce high-mannose containing N-glycans, including unicellular and multicellular fungi are modified to produce O-glycans or other structures along human glycosylation pathways. This is achieved using a combination of engineering and/or selection of strains which: do not express certain enzymes which create the undesirable complex structures characteristic of the fungal glycoproteins, which express exogenous enzymes selected either to have optimal activity under the conditions present in the fungi where activity is desired, or which are targeted to an organelle where optimal activity is achieved, and combinations thereof wherein the genetically engineered eukaryote expresses multiple exogenous enzymes required to produce "human-like" glycoproteins.
L'invention concerne le développement de lignées cellulaires ayant des voies de glycosylation modifiées qui leur permettent de réaliser une séquence de réactions enzymatiques, qui imitent le traitement de glycoprotéines chez les êtres humains. Des protéines recombinantes exprimées dans ces hôtes synthétisés par génie génétique produisent des glycoprotéines davantage similaires, voire sensiblement identiques, à leurs homologues humains. Les eucaryotes inférieurs, qui produisent ordinairement des N-glycanes à teneur élevée en mannose, comprenant des champignons unicellulaires et multicellulaires, sont modifiés de façon à produire des O-glycanes ou autres structures parmi les voies de glycosylation humaine. Ceci est obtenu à l'aide d'une combinaison de synthèse par génie génétique et/ou sélection de souches qui n'expriment pas certaines enzymes créant les structures complexes indésirables caractéristiques des glycoprotéines fongiques, qui expriment des cellules exogènes sélectionnées soit pour avoir une activité optimale dans les conditions présentes dans les champignons où l'activité est désirée, soit qui sont dirigées vers un organelle où une activité optimale est obtenue, et des combinaisons de ceux-ci dans lesquelles l'eucaryote synthétisé par génie génétique exprime de multiples enzymes exogènes requises afin de produire des glycoprotéines "de type humain".
Gustafsson Anki
Holgersson Jan
Recopharma Ab
Ridout & Maybee Llp
LandOfFree
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