C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C12N 9/50 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01)
Patent
CA 2605149
Disclosed is a method for the production of a heterologous polypeptide of interest with a homogenous N-terminus, using a fusion polypeptide comprising the polypeptide of interest and N-terminally thereto a polypeptide exhibiting autoproteolytic function, said method comprising the steps of a) binding of the fusion polypeptide in a soluble, autoproteolytically inactive form by an affinity chromatography system, b) refolding of the fusion polypeptide, thereby activating the autoproteolytic function of the fusion polypeptide and causing cleavage of the heterologous polypeptide of interest, and c) subsequently eluting the heterologous polypeptide of interest, wherein said steps are conducted on one affinity chromatography system.
Cette invention concerne une méthode d'obtention d'un polypeptide d'intérêt présentant un terninal N homogène, au moyen d'un polypeptide de fusion comprenant le polypeptide d'intérêt auquel est rattaché par le terminal N un polypeptide doté d'une fonction autoprotéolytique. Ladite méthode englobe les opérations suivantes: (a) liaison du polypeptide de fusion dans une forme soluble, inactive au plan autoprotélolytique au moyen d'un système de chromatographie d'affinité; (b) repliage du polypeptide de fusion, ce qui a pour effet d'activer la fonction autoprotéolytiquie de ce peptide et de causer un clivage du polypeptide hétérologue d'intérêt; et (c) élution subséquente du polypeptide hétérologue d'intérêt, lesdites opérations étant menées avec un seul système de chromaticité d'affinité.
Hahn Rainer
Jungbauer Alois
Kaar Waltraud
Tscheliessnig Anne
Boehringer Ingelheim Austria Gmbh
Boehringer Ingelheim Rcv Gmbh & Co Kg
Ridout & Maybee Llp
Sandoz Ag
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1614307