C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/70 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
Patent
CA 2274608
A two-hybrid system that can detect homo- and heterodimeric protein interactions in E. coli and other cells. This system is useful for the same applications as a yeast two-hybrid system, i.e. interaction cloning, mapping protein interaction domains, analysing protein interactions, detecting protein interactions and detecting modulators thereof. The invention concerns a prokaryotic host cell comprising: a) a fusion protein having (i) a first DNA-binding domain and (ii) a first interacting domain; b) a fusion protein having (i) a second DNA-binding domain and (ii) a second interacting domain capable of binding to the first interacting domain; and c) a nucleic acid molecule having a reporter gene operatively linked to (i) a promoter, (ii) a first operator site capable of binding to the first DNA-binding domain, located upstream of the promoter, and (iii) a second operator site capable of binding the second DNA-binding domain, located downstream of the promoter of the reporter gene; wherein binding of the first interacting domain to the second interacting domain is signaled by altered expression of the reporter gene.
Système à deux hybrides permettant de détecter les interactions entre protéines homo et hétérodimères dans les E. Coli et d'autres cellules. Ledit système a les mêmes applications que les systèmes de levures à deux hybrides: c.-à-d. le clonage interactif, la cartographie des domaines d'interaction entre protéines, l'analyse des interactions entre protéines, la détection des interactions entre protéines, et la détection de leurs modulateurs. L'invention porte sur une cellule hôte procaryote comportant: (a) une protéine de fusion présentant (i) un premier domaine de fixation d'ADN et (ii) un premier domaine d'interaction; (b) une protéine de fusion présentant (i) un deuxième domaine de fixation d'ADN et (ii) un deuxième domaine d'interaction pouvant se fixer au premier domaine d'interaction; et (c) une molécule d'acide nucléique présentant un gène marqueur fonctionnellement lié: (i) à un promoteur, (ii) à un premier site opérateur pouvant se fixer au premier domaine de fixation d'ADN situé en amont du gène marqueur, (iii) à un deuxième site opérateur pouvant se fixer au deuxième domaine de fixation d'ADN situé en aval du gène marqueur. La fixation du premier domaine d'interaction au deuxième domaine d'interaction se signale par une modification de l'expression du gène marqueur.
Bristol-Myers Squibb Company
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1739687