Protein expression in baculovirus vector expression systems

Details Protein expression in baculovirus vector expression systems Protein expression in baculovirus vector expression systems

A - Human Necessities

61

K

A61K 39/12 (2006.01) C07K 14/18 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/866 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12N 15/40 (2006.01)

Patent

CA 2315248

The invention relates to a method to increase protein expression in baculo vector virus expression systems. The invention provides a method to produce a recombinant protein in insect-cell culture which comprises selecting a recombinant baculovinis expressing said protein, growing insect cells in growth medium in a culture vessel with a sufficient volume to contain at least 2 liters and infecting the cells with an inoculum of at least one baculovirus at a cell density of 1 x 10 5 to 5 x 10 6 cells/ml with an m.o.i of <0.01. The invention furthermore provides a method to produce recombinant pestivirus E2 or E rns protein or fragments thereof in insect cell culture characterised by a final concentration of said protein (fragments) in the growth medium at harvest of at least 100 µg/ml. The invention furthermore provides a method to produce recombinant follicle stimulating hormone, .alpha.- units and/or .beta.-units and complexes and fragments thereof, at a concentration in the growth medium at harvest of at least 15 µ/ml.

L'invention concerne un procédé permettant d'accélérer l'expression de protéines dans des systèmes d'expression de vecteurs de baculovirus. L'invention concerne un procédé de production d'une protéine recombinée dans une culture de cellules d'insectes, lequel procédé consiste à exprimer ladite protéine, à faire croître les cellules d'insectes dans un milieu de croissance disposé dans un récipient de culture d'un volume suffisant pour contenir au moins deux litres, et à infecter les cellules avec un inoculum d'au moins un baculovirus présentant une densité cellulaire de 1 x 10<5> à 5 x 10<6 >cellules/ml, avec une multiplicité d'infection inférieure à 0,01. L'invention concerne, en outre, un procédé de production d'une protéine recombinée de pestivirus E2 ou E<rns> ou des fragments de ladite protéine dans une culture de cellules d'insectes, caractérisé par une concentration finale de ladite protéine (fragments) dans le milieu de croissance à maturité d'au moins 100 mu g/ml. L'invention concerne enfin un procédé de production d'une hormone follico-stimulante recombinée, d'unités alpha et/ou beta et de complexes et de fragments de ladite hormone, à une concentration du milieu de croissance à maturité d'au moins 15 mu g/ml.

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