Protein expression in rodent cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/869 (2006.01)

Patent

CA 2624685

A method is described for the expression of heterologous polypeptides in rodent cells. The method comprises the oriP/EBNA-1 episomal replication and maintenance system of the Epstein-Barr-Virus (EBV). With the stable integration of an EBNA-1 -protein expression cassette under the control of a promoter into the genome of a rodent cell an EBNA-I -protein expression in the cells was obtained. The heterologous protein is expressed from an episome comprising an EBV origin of replication and a functional expression cassette of said heterologous protein. The invention further comprises transformed rodent cell lines, a method for the production of a heterologous protein in said cell lines and a kit for the construction of said cell lines.

La présente invention concerne un procédé pour exprimer des polypeptides hétérologues dans des cellules de rongeur. Ce procédé comprend la mise en oeuvre d'un système de réplication et de maintenance de oriP/EBNA-1 sous forme épisomique du virus d'Epstein-Barr (VEB). L'intégration stable d'une cassette d'expression de protéine EBNA-1 sous le contrôle d'un promoteur dans le génome d'une cellule de rongeur a permis d'obtenir une expression de protéine EBNA-1 dans les cellules. La protéine hétérologue est exprimée à partir d'un épisome comprenant une origine de réplication du VEB et une cassette d'expression fonctionnelle de la protéine hétérologue. Cette invention concerne également des lignées de cellules de rongeur transformées, un procédé pour produire une protéine hétérologue dans ces lignées cellulaires, ainsi qu'un kit pour former ces lignées cellulaires.

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