C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/54 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 11/00 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12P 7/64 (2006.01)
Patent
CA 2550800
The present invention relates to a method of producing a variant glycolipid acyltransferase enzyme comprising: (a) selecting a parent enzyme which is a glycolipid acyltransferase enzyme characterised in that the enzyme comprises the amino acid sequence motif GDSX, wherein X is one or more of the following amino acid residues L, A, V, I, F, Y, H, Q, T, N, M or S; (b) modifying one or more amino acids to produce a variant glycolipid acyltransferase; (c) testing the variant glycolipid acyltransferase for transferase activity, an optionally hydrolytic activity, on a galactolipid substrate, and optionally a phospholipid substrate and/or optionally a triglyceride substrate; (d) selecting a variant enzyme with an enhanced activity towards galactolipids compared with the parent enzyme; and optionally (e) preparing a quantity of the variant enzyme. The present invention further relates to variant lipid acyltransferase enzyme characterised in that the enzyme comprises the amino acid sequence motif GDSX, wherein X is one or more of the following amino acid residues L, A, V, I, F, Y, H, Q, T, N, M or S, and wherein the variant enzyme comprises one or more amino acid modifications compared with a parent sequence at any one or more of the amino acid residues defined in set 2, set 4, set 6 or set 7.
La présente invention concerne un procédé permettant de produire une variante de l'enzyme acyltransférase glycolipidique et consistant: (a) à sélectionner une enzyme parente qui est une enzyme acyltransférase glycolipidique qui se caractérise en ce qu'elle comprend le motif de séquence d'acides aminés GDSX, X désignant un ou plusieurs des résidus d'acides aminés suivants: L, A, V, I, F, Y, H, Q, T, N, M ou S; (b) à modifier un ou plusieurs acides aminés pour produire une variante de l'acyltransférase glycolipidique; (c) à tester la variante de l'acyltransférase glycolipidique pour connaître son activité transférase, éventuellement une activité hydrolytique, sur un substrat galactolipidique et éventuellement un substrat phospholipidique et/ou éventuellement un substrat de triglycérides; (d) à sélectionner une variante d'une enzyme présentant une activité accrue à l'égard des galactolipides comparée à celle de l'enzyme parente; et éventuellement (e) à préparer une certaine quantité de la variante de l'enzyme. Cette invention concerne également une variante de l'enzyme acyltransférase lipidique qui se caractérise en ce que l'enzyme comprend le motif de séquence d'acides aminés GDSX, X désignant un ou plusieurs des résidus d'acides aminés suivants: L, A, V, I, F, Y, H, Q, T, N, M ou S, laquelle variante de l'enzyme comprend une ou plusieurs modifications d'acides aminés comparée à une séquence parente au niveau d'un ou plusieurs des résidus d'acides aminés définis dans l'ensemble 2, l'ensemble 4, l'ensemble 6 ou l'ensemble 7.
Kellet-Smith Anja Hemmingsen
Kreij Arno de
Lorentsen Rikke Hoegh
Mikkelson Jorn Dalgaard
Soe Jorn Borch
Danisco A/s
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1571294